[发明专利]一种用于间充质干细胞外泌体制备的培养装置

说明书

本发明公开了一种用于间充质干细胞外泌体制备的培养装置，包括固定外壳组件，还包括：所述固定外壳组件包括固定箱，所述固定箱的正面活动套接有推拉门板，所述推拉门板的正面固定连接有U型把手，所述固定箱内侧底部的靠近背面固定连接有第一固定板，所述固定箱内侧的顶部固定连接有移动营养液注入组件，所述移动营养液注入组件包括第二固定板，所述第二固定板正面的两侧均固定连接有两个第一滑杆，所述第一滑杆的外侧活动套接有第一滑块，所述固定箱的正面固定连接有第三固定板，有利于在不打开无菌室的情况下对干细胞培养皿中的细胞添加营养液，减少了工作人员进行添加营养液时空气中的细菌与霉菌对细胞进行污染的情况。

技术领域

本发明涉及细胞培养技术领域，更具体地涉及一种用于间充质干细胞外泌体制备的培养装置。

背景技术

干细胞是一类具有自我复制能力的多潜能细胞，在一定条件下，它可以分化成多种功能细胞，根据干细胞所处的发育阶段分为胚胎干细胞和成体干细胞，根据干细胞的发育潜能分为三类：全能干细胞、多能干细胞和单能干细胞，干细胞是一种未充分分化，尚不成熟的细胞，具有再生各种组织器官和人体的潜在功能，医学界称为万用细胞。

干细胞培养是指从供体内取出组织后，经机械以及消化分离成单个细胞或单一型细胞群，使之在体外模拟人体生理环境，在无菌、适当温度和一定的营养条件下，生存、生长和繁殖。原代培养细胞常有不同的细胞成分，生长缓慢，但是更能代表所来源的组织细胞类型和表达组织的特异性特征。利用原代细胞培养做各种实验，如药物测试、细胞分化及病毒学方面的试验效果很好。其操作步骤如下。

1.剪切组织先将所取得的组织，用D-Hanks或Hanks液清洗，以去除表面血污，并用手术镊去除黏附的结缔组织等非培养所需组织。再次清洗后，用手术刀将组织切成若干小块，移入青霉素小瓶或小烧杯中，加入适量缓冲液，用弯头眼科剪，反复剪切组织，直到组织成糊状，约1mm3大小。静置片刻后，用吸管吸去上层液体，加入适当的缓冲液再清洗一次。

2.消化分离消化分离的目的是将细小的组织块消化分离成细胞团或分散的单个细胞，以利于进一步的培养，常用的消化酶有胰蛋白酶和胶原酶。

3.培养细胞悬液用计数板进行细胞计数。用培养液将细胞数调整(2～5)×105cells/ml，或实验所需密度，分装于培养瓶中，使细胞悬液的量以覆盖后略高于培养瓶底部为宜。置CO2培养箱内，5％CO2，37℃静置培养。一般3～5d，原代培养细胞可以黏附于瓶壁，并伸展开始生长，可补加原培养液量1/2的新培养液，继续培养2～3d后换液，一般7～14d可以长满瓶壁，进行传代。

现有技术的不足：

其一：细菌或霉菌污染是培养失败的常见原因，必须加强各个环节的无菌操作观念，以预防为主，一旦污染，一般很难消除，但是在现有细胞培养的过程中需要工作人员手动向培养皿中添加营养液，手动添加时会使培养皿接触外界空气，有几率受到空气中的细菌与霉菌的感染。

其二：干细胞防止培养皿后需置于CO2培养箱的头24～48h(必要时72h)内，应处于绝对静置状态，切忌不时地取出培养瓶观察生长状况，这将使原代分离细胞难以贴壁，更谈不上伸展和增殖，不必担心培养液中的营养成分会消耗光，在细胞增殖之前对营养的要求并不大，原代培养初期仅加一薄层培养液的目的也在于有利于细胞贴壁伸展，CO2培养箱中的CO2浓度须保持在5％～8％之间，在向CO2培养箱诸如空气时会把空气中的细菌与霉菌带入CO2培养箱，影响干细胞的培养。

发明内容

为了克服现有技术的上述缺陷，本发明提供了一种用于间充质干细胞外泌体制备的培养装置，以解决上述背景技术中存在的问题。

本发明提供如下技术方案：一种用于间充质干细胞外泌体制备的培养装置，包括固定外壳组件，还包括：

移动营养液注入组件：所述固定外壳组件内侧的顶部固定连接有移动营养液注入组件；