[发明专利]一种熟地黄多糖的制备方法、产品及其应用

权利要求书

1.一种熟地黄多糖的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：首先对熟地黄进行酶解，所得酶解液经超声提取、醇沉得到熟地黄总多糖，之后采用三氯乙酸-乙醚法去除所得熟地黄总多糖中的蛋白，将得到的熟地黄粗多糖经离子交换色谱柱分离，再经凝胶柱串联色谱分离，得到所述熟地黄多糖；

所述熟地黄的制备方法为：取鲜地黄，切成厚度为0.5～1.0cm的薄片，加入6～16倍体积的水，浸泡2～3h，之后加入鲜地黄2倍体积的黄酒，静置8～10h，然后在0.10～0.15MPa下蒸制4～5h，取出，放入50℃烘箱中干燥24h，即得所述熟地黄；

所述酶解具体方法为：首先向熟地黄中加水，并加入由果胶酶、木瓜蛋白酶及木质素过氧化物酶组成的复合酶对熟地黄进行酶解，之后再加入胰蛋白酶酶解；

所述复合酶中果胶酶、木瓜蛋白酶及木质素过氧化物酶的质量比为2∶2∶1，复合酶与熟地黄的质量比为0.12∶1，水与熟地黄的体积比为(5～8)∶1；

所述复合酶对熟地黄进行酶解时的pH在4～5之间，在50℃下酶解1h；

所述胰蛋白酶与熟地黄的质量比为0.05∶1，胰蛋白酶加入前调节pH为7.5～8.5之间，在37℃下酶解1h，之后加热至95℃灭酶。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述超声提取温度为50℃，功率为80W，时间为1h。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述醇沉采用乙醇，溶液中乙醇浓度为90wt％；所述三氯乙酸-乙醚法采用的萃取液由三氯乙酸和乙醚按体积比1:8配制得到。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述离子交换色谱柱分离的色谱条件为：

色谱柱：DEAE-Sepharose FF柱；

流速：50mL/h；

梯度洗脱程序：0～20min水，20～40min 0.2M NaCl，40～60min 0.5M NaCl，60～80min2M NaCl；所述凝胶柱串联色谱的填料为Superdex-200。

5.一种根据权利要求1～4任一项所述的制备方法制备得到的熟地黄多糖。

6.权利要求5所述的熟地黄多糖在制备心肌保护药物中的应用。