[发明专利]分析和检测慢病毒载体介导的目的基因的拷贝数的方法

权利要求书

1.一种检测宿主细胞中目的基因拷贝数的方法，所述目的基因通过慢病毒载体导入，所述方法包括以下步骤：

1)检测细胞中Psi基因的拷贝数；

2)检测细胞中单拷贝基因的拷贝数；

3)按照以下公式计算细胞中目的基因的拷贝数：

目的基因拷贝数/细胞＝2×Psi拷贝数/单拷贝基因

其中，所述Psi基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，所述单拷贝基因是核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示的端粒逆转录酶TERT基因；

所述慢病毒载体是第一代到第三代的HIV-I慢病毒载体系统中的任一种；

其中检测所述Psi基因拷贝数的正向引物和反向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:3、4所示；检测所述TERT基因拷贝数的正向引物和反向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:6、7所示；并且，检测所述Psi基因的探针如SEQ ID NO:5所示；检测所述TERT基因的探针如SEQ IDNO:8所示。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述宿主细胞为真核细胞。

3.一种检测宿主细胞中目的基因拷贝数的试剂的组合，所述试剂的组合包括针对Psi基因的正向引物和反向引物和探针，针对所述宿主细胞中的单拷贝TERT基因的正向引物和反向引物和探针，

其中针对Psi基因的正向引物和反向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:3、4所示；针对TERT基因的正向引物和反向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:6、7所示；并且，针对所述Psi基因的探针如SEQ ID NO:5所示；针对所述TERT基因的探针如SEQ ID NO:8所示。

4.一种PCR反应体系，其特征在于，所述反应体系包含如权利要求3所述的试剂的组合以及进行PCR反应所需的其它试剂。

5.一种试剂盒，所述试剂盒中包含容器和权利要求3所述的试剂的组合或权利要求4所述的PCR反应体系。

6.一种qPCR方法，所述方法包括利用权利要求3所述的试剂的组合或权利要求4所述的PCR反应体系进行qPCR反应的步骤。