[发明专利]一种具有抗氧化活性的多棘海盘车皂苷制备工艺

权利要求书

1.一种具有抗氧化活性的多棘海盘车皂苷制备工艺，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一：对多棘海盘车样品进行预处理；

步骤二：对样品粉末采用索氏提取法回流提取海星皂苷；

步骤三：对提取液进行浓缩；

步骤四：对多棘海盘车皂苷进行分离萃取；

步骤五：对样本进行硅胶柱层析；

步骤六：对各部洗脱液进行分别收集并进行浓缩、干燥；

步骤七：对多棘海盘车皂苷样品进行活性测定实验；

步骤八：对皂苷样品的抗氧化活性筛选实验结果。

2.根据权利要求1所述的一种具有抗氧化活性的多棘海盘车皂苷制备工艺，其特征在于：所述步骤一将多棘海盘车样品干燥后，用高速粉碎机打成碎末状。

3.根据权利要求1所述的一种具有抗氧化活性的多棘海盘车皂苷制备工艺，其特征在于：所述步骤二粗皂苷的提取按照1:10的料液比在圆底烧瓶装入一定量的85％乙醇，采用索氏提取法回流提取海星皂苷1.5h，重复提取海星皂苷3次。

4.根据权利要求1所述的一种具有抗氧化活性的多棘海盘车皂苷制备工艺，其特征在于：所述步骤三将所有提取液用旋转蒸发仪在54℃条件下进行浓缩，全部浓缩完成后，将浓缩液放入细口瓶中冷藏备用。

5.根据权利要求1所述的一种具有抗氧化活性的多棘海盘车皂苷制备工艺，其特征在于：所述步骤四粗皂苷提取液与等体积的石油醚混合于分液漏斗进行液液萃取以去除提取液中的脂类杂质，重复萃取三次后分离出水层合并萃取液并浓缩；将浓缩后的萃取液再用等体积的乙酸乙酯萃取三次，继续分离出水层合并萃取液并浓缩；最后用等体积的水饱和的正丁醇萃取三次，分离出正丁醇层合并后浓缩至浸膏状样品。

6.根据权利要求1所述的一种具有抗氧化活性的多棘海盘车皂苷制备工艺，其特征在于：所述步骤五和步骤六氯仿与甲醇的混合液梯度依次设定为10∶0、9∶1、8∶2、7∶3、6∶4、5∶5、4∶6、0∶10，分别收集各部洗脱液并进行浓缩、干燥后冷藏保存备用。

7.根据权利要求1所述的一种具有抗氧化活性的多棘海盘车皂苷制备工艺，其特征在于：所述步骤七抗氧化活性的研究采用对DPPH自由基清除率测定的方法进行分析。取1mL分离精制后的多棘海盘车皂苷样品，加入3mL DPPH自由基溶液，静置反应10min，在517nm下测定吸光度，将测得的吸光度记为Ai；取1mL分离精制后的多棘海盘车皂苷样品加3mL无水乙醇测定吸光度记为Aj；取1mL空白试剂加3mL DPPH溶液测定吸光度记为A1，根据公式计算皂苷样品清除率。