[发明专利]交链格孢JTF001的发酵液在抑制瓜列当种子萌发中的应用

说明书

本发明提供了交链格孢JTF001的发酵液在抑制瓜列当种子萌发中的应用，所述交链格孢JTF001的发酵液包含3‑乙酰‑5‑仲丁基‑4‑羟基‑3‑吡咯啉‑2‑醇，和/或2，3，4，5'‑四氢‑2,3,7‑三羟基‑9‑甲氧基‑4'‑甲基‑二苯并‑6‑吡喃酮。本发明首次公开了交链格孢JTF001的发酵液中3‑乙酰‑5‑仲丁基‑4‑羟基‑3‑吡咯啉‑2‑醇和2，3，4，5'‑四氢‑2,3,7‑三羟基‑9‑甲氧基‑4'‑甲基‑二苯并‑6‑吡喃酮抑制瓜列当种子萌发的作用，这两种化合物可直接用于防治瓜列当，对瓜列当的抑制作用显著。

技术领域

本发明涉及应用农业微生物与生物防治技术领域，具体涉及交链格孢JTF001的发酵液在抑制瓜列当种子萌发中的应用。

背景技术

瓜列当(Orabanche aegyptaica)是全寄生性高等植物，广泛地分布在地中海地区、亚洲西部和欧洲东部，对当地的农作物生产造成巨大的影响，被认为是世界范围内危害最严重的寄生性杂草。我国瓜列当主要分布于新疆、吉林、甘肃、黑龙江、河北、山东、山西、陕西、辽宁、青海、内蒙古、四川等多个省份。我国新疆是瓜列当分布和危害严重的地区，其对甜瓜、西瓜和番茄可造成半成以上的减产。由于瓜列当根寄生的特性，它对寄主的危害主要发生在出苗之前的地下生长时期，因此常见的人力拔除(伤害寄主根系)和农药等除草方式几乎不起作用，造成在新疆当地无法有效防除而严重影响农业生产。

微生物源除草剂是利用微生物产生的代谢产物进行杂草防治的一种新型生物除草剂。通常大多数微生物如细菌、放线菌、腐生类微生物、植物病原真菌以及藻类等都含有除草活性化合物，是开发除草剂的天然宝库。近几年利用天然化合物防治瓜列当已经成为研究的热点之一。利用微生物代谢产物，以及这些代谢产物的人工模拟化合物研究开发具有高活性﹑高选择性﹑高安全性天然除草剂将会是新型除草剂发展的重要方向之一。

我们的先前研究发现交链格孢的粗提物具有防治瓜列当种子萌发的作用，但是其发酵液中的成分很多，具体是哪种物质成分发挥作用尚不明确。因此，有必要从交链格孢的粗提物中获得活性单体化合物，从而提供一种有效防治瓜列当的微生物菌株及其活性次级代谢产物。

发明内容

为了解决以上技术问题，本发明的目的在于提供一种交链格孢JTF001的发酵液在抑制瓜列当种子萌发中的应用，所述交链格孢JTF001的发酵液包含3-乙酰-5-仲丁基-4-羟基-3-吡咯啉-2-醇，和/或2，3，4，5'-四氢-2,3,7-三羟基-9-甲氧基-4'-甲基-二苯并-6-吡喃酮，为防治瓜列当提供了一个新的路径。

本发明所采用的技术方案如下：

根据本申请的一个方面，提供了一种交链格孢JTF001的发酵液在抑制瓜列当种子萌发中的应用，所述交链格孢JTF001的发酵液包含3-乙酰-5-仲丁基-4-羟基-3-吡咯啉-2-醇，和/或2，3，4，5'-四氢-2,3,7-三羟基-9-甲氧基-4'-甲基-二苯并-6-吡喃酮。

在本申请的具体实施方案中，所述交链格孢JTF001的发酵液的获得方法包括以下步骤：

(1)将交链格孢JTF001进行固体发酵，得到固体发酵物；

(2)使用乙酸乙酯浸泡，得到提取液，将所述提取液进行减压蒸馏后，得到粗提物浸膏；

(3)将所述粗提物浸膏溶解进行硅胶柱层析分离，得到所述交链格孢JTF001的发酵液。

在本申请的具体实施方案中，步骤(1)中，将交链格孢JTF001在大米固体培养基中进行固体发酵，所述发酵的条件包括：在温度25～30℃、黑暗静置培养10～25d。

在本申请的具体实施方案中，步骤(2)中，使用乙酸乙酯浸泡15～30h，然后超声提取0.5～1.5h。

在本申请的具体实施方案中，步骤(3)中，所述硅胶柱层析色谱分离时，使用石油醚和乙酸乙酯洗脱液，及甲醇和乙酸乙酯洗脱液，得到所述粗提物；