[发明专利]检测单端孢霉烯族毒素及其类似物的方法及其试剂盒

说明书

本发明公开了检测单端孢霉烯族毒素及其类似物的方法及其试剂盒，其中，该检测单端孢霉烯族毒素及其类似物的方法：将待测样本进行提取处理，以便得到待测液；将所述待测液进行高效液相色谱高分辨质谱检测，以便得到检测结果；以及基于所述检测结果中的质谱多重特征结构碎片数据，判断所述待测样中是否含有所述单端孢霉烯族毒素及其类似物的方法。该方法不仅能检测到已知的单端孢霉烯族毒素，还可筛查潜在的单端孢霉烯族毒素及其类似物，检测准确度高，尤其适用于粮食中单端孢霉烯族毒素及其类似物的检测，有利于保证粮食类食品安全。

技术领域

本发明涉及分析化学领域，具体地，涉及检测单端孢霉烯族毒素及其类似物的方法，以及检测单端孢霉烯族毒素及其类似物的试剂盒。

背景技术

真菌毒素严重危害人畜安全，同时人们也缺乏对未知新型真菌毒素及其衍生物认知和监管。真菌毒素通常出现在粮谷及其制品中，特别是未知新型真菌毒素及其衍生物，因其含量较低，通过现有技术手段很难被发现和检测。对于真菌毒素的检测，传统的分析方法有紫外光谱法、红外光谱法、酶联免疫吸附法(ELISA)和核磁共振波谱法(NMR)等。其中，核磁共振是鉴定未知真菌毒素最常用的方法，通过对一级NMR波谱和二级NMR波谱的分析，可以获得未知化合物的结构信息。但核磁共振法对被测物样本量和纯度要求较高，而未知真菌毒素往往含量较低且存在于较复杂的食品基质中，很难满足核磁共振检测要求。ELISA利用抗原-抗体特异性免疫反应发现未知化合物，文献中报导过脱氧雪腐镰刀菌烯醇-3-葡萄糖苷和脱氧雪腐镰刀菌烯醇的酰化衍生物可与脱氧雪镰刀菌醇酶联免疫测定试剂盒发生交叉反应，使检测响应值高于脱氧雪镰刀菌醇的实际浓度，从而发现其衍生物的存在。但该方法不能提供推断化合物分子量和其结构所需的信息，因此无法推断未知化合物结构。现有传统方法因不能准确获得化合物结构信息，从而无法发现未知风险物质，已不能满足目前对于未知真菌毒素及其衍生物的检测技术需求。

因此，建立一种能够检测和鉴定各种粮谷中痕量未知真菌毒素的方法，尤其检测单端孢霉烯族毒素的方法是具有重要意义。

发明内容

本发明旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明的一个目的在于提出一种检测单端孢霉烯族毒素及其类似物的方法，该方法不仅能检测到已知的单端孢霉烯族毒素，还可筛查潜在的单端孢霉烯族毒素及其类似物，检测准确度高，尤其适用于粮食中单端孢霉烯族毒素及其类似物的检测，有利于保证粮食类食品安全。

需要说明的是，本发明是基于发明人的下列工作而完成的：

发明人发现，发明人分析8种单端孢霉烯族毒素(二乙酰镳草镰刀菌烯醇(DAS)、新茄病镰刀菌烯醇(NEO)、T-2毒素(T-2)、HT-2毒素(HT-2)、镰刀菌烯酮(F-X)、脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DEO)、3-乙酰脱氧雪腐镰刀菌烯醇(3ADON)、15-乙酰脱氧雪腐镰刀菌烯醇(15ADON))，均为单端孢霉烯族毒素。依据其质谱裂解规律分析，发现A型单端孢霉烯族毒素化合物和B型单端孢霉烯族毒素化合物的裂解行为相似，但同类化合物的裂解行为相同，由于取代基个数的不同，两类化合物产生的特征碎片略有不同(见图1)。因此，单端孢霉烯族毒素的多重特征碎片被分为4组(见表1)，且丰度均在80％以上，质量精度在5ppm以内，可作为单端孢霉烯族毒素化合物的多重特征结构碎片。

表1

因而，根据本发明的一个方面，本发明提供了一种检测单端孢霉烯族毒素及其类似物的方法。根据本发明的实施例，该方法包括：将待测样本进行提取处理，以便得到待测液；将所述待测液进行高效液相色谱高分辨质谱检测，以便得到检测结果；以及基于所述检测结果中的质谱多重特征结构碎片数据，判断所述待测样中是否含有所述单端孢霉烯族毒素及其类似物的方法。