[发明专利]一种西他列汀中间体的生物合成方法

权利要求书

1.一种西他列汀中间体的生物合成方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

在无机碱存在下，在非水溶性溶剂中使式Ⅱ化合物4-(2,4,5-三氟苯基)-5-氧代丁酸与式Ⅲ化合物3-(三氟甲基)-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪或其盐酸盐在辅酶和催化量的酰胺合酶的催化作用下并控制温度在35℃～45℃下进行酶催化反应，所述酶催化反应的过程中控制反应体系的pH值为8.0～8.5，所述辅酶选自NAD⁺或NADP⁺，得到产物式Ⅰ化合物西他列汀中间体：

所述酰胺合酶的蛋白序列如SEQ ID NO.1所示。

2.根据权利要求1所述西他列汀中间体的生物合成方法，其特征在于，所述酰胺合酶的加入量为80g/L～100g/L。

3.根据权利要求1或2所述西他列汀中间体的生物合成方法，其特征在于，所述无机碱选自氢氧化钠或氢氧化钾。

4.根据权利要求1或2所述西他列汀中间体的生物合成方法，其特征在于，所述非水溶性溶剂选自乙酸乙酯、二甲基叔丁基醚、二氯甲烷和氯仿中的一种或几种。

5.根据权利要求1或2所述西他列汀中间体的生物合成方法，其特征在于，所述式Ⅲ化合物3-(三氟甲基)-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪或其盐酸盐与式Ⅱ化合物4-(2,4,5-三氟苯基)-5-氧代丁酸的摩尔比为1：1.0～1.25。