[发明专利]抗MUM1蛋白单克隆抗体、细胞系及其应用

说明书

本发明涉及生物检测领域，提供了一种抗MUM1蛋白单克隆抗体,其重链和轻链可变区的氨基酸序列分别是SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列。发明人还提供了一株分泌抗MUM1蛋白的杂交瘤细胞系，所述细胞系为小鼠杂交瘤细胞系5G5C11H10，保藏号为：CGMCC NO.22313。抗MUM1蛋白单克隆抗体,具有高特异性、敏感性，可以特异性识别表达MUM1蛋白的细胞，适用于免疫学检测，特别是免疫组化检测。

技术领域

本发明涉及生物检测领域，特别涉及抗MUM1蛋白单克隆抗体、细胞系及其应用。

背景技术

MUM1基因即多发性骨髓瘤相关癌基因，别名PIP，LSIRF，ICSAT和NFEMS。是一个分子量为50kDa蛋白。表达产物为一种转录因子，是干扰素家族的成员之一，在基因调控中起重要作用。其异常表达是由于染色体易位：t(6；14)(p25；q32)，即MUMl易位到14号染色体IgH增强子的位点，导致MUMl蛋白过表达，促进了肿瘤的形成。

MUM1表达于正常的浆细胞、晚期B细胞和活化的T细胞，并且在一些B细胞和T细胞淋巴瘤中也有表达，是B细胞向浆细胞分化的重要调控因子，传统认为MUM1是生发中心后期分化阶段B细胞标记物。并认为MUM1的表达可能是检测恶性B细胞增生的一个有用的指标。MUM1在T淋巴细胞中的表达主要位于细胞核，在正常淋巴组织中主要表达于浆细胞、5％～10％的生发中心B细胞以及激活的T细胞,并且不伴有BCL_6的表达。MUM1在淋巴造血系统中过表达可促进肿瘤形成,研究表明B细胞淋巴瘤中MUM1的表达提示该细胞处于分化的终末阶段且MUM1在起源于前驱T细胞的T_LBL/L组中的表达明显低于ALCL组及PTL组,因此可推测MUM1在T淋巴细胞的活化上起到了重要作用。弥漫大B细胞淋巴瘤(Diffuse Large B—cell Lymphoma，DLBCL)是非霍奇金淋巴瘤中最常见的一种亚型，约占每年新诊断非霍奇金淋巴瘤总数30—40％，其恶性程度较高，在病理形态及临床特征上均具有明显的异质性。DLBC因其具有高度异质性且没有明确的组织学标准进行细分，患者的预后难以预测。Hans等应用DNA微阵列技术根据CD10、Bcl－6及MUM1将DLBCL分为(germinal center B－cell－like，GCB)型和non－GCB型，GCB型的预后明显好于non－GCB型，但因价格昂贵在临床难以推广。寻找简单、经济的预测方法成为必然。随着抗原技术的进步、抗体的广泛应用、自动免疫组化仪的普及，免疫组化技术成为检测肿瘤细胞起源最价廉物美的方法。目前DLBCL中，运用较多的是CD10、Bcl－6及MUM1的联合检测。

发明内容

发明人提供了一种抗MUM1蛋白单克隆抗体，所述单克隆抗体重链和轻链可变区的氨基酸序列分别是SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列。

进一步地，所述单克隆抗体重链和轻链可变区氨基酸序列分别是SEQ IDNO.4和SEQ ID NO.5所示的核苷酸序列所编码。

进一步地，所述单克隆抗体制备过程中，免疫小鼠所用的抗原为SEQ IDNO.1所示核苷酸序列编码，经由大肠杆菌重组表达的重组蛋白。

进一步地，所述单克隆抗体特异性识别人MUM1蛋白。

进一步地，所述单克隆抗体由保藏号为CGMCC NO.22313的杂交瘤细胞系产生。所述细胞株为小鼠杂交瘤细胞系5G5C11H10，分类命名为：小鼠杂交瘤细胞系，该细胞系已于2021年04月29日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。

进一步地，所述抗MUM1蛋白为小鼠IgG1亚型单克隆抗体。

发明人还提供了一种抗MUM1蛋白单克隆抗体的制备方法，其免疫小鼠所用的抗原为SEQ ID NO.1所示核苷酸序列编码，经由大肠杆菌重组表达的重组蛋白。