[发明专利]用于预防和/或治疗猪腹泻病的蛋黄抗体、制剂及其制备方法在审
| 申请号： | 202111246722.1 | 申请日： | 2021-10-26 |
| 公开（公告）号： | CN113929775A | 公开（公告）日： | 2022-01-14 |
| 发明（设计）人： | 李晶梅;谢红玲;朱薇;石宝兰;漆世华;王焕君;于义娟;柏娇;张飞雁;薛霜;王碧群;秦红刚;韩兴;秦涛;闵娟娟;程敏华;张治中;周平 | 申请（专利权）人： | 国药集团动物保健股份有限公司 |
| 主分类号： | C07K16/10 | 分类号： | C07K16/10;C07K16/02;A61K39/42;A61P31/14 |
| 代理公司： | 武汉科皓知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 42222 | 代理人： | 江慧 |
| 地址： | 430075 湖北省武汉市东湖新技*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 预防 治疗 腹泻 蛋黄 抗体 制剂 及其 制备 方法 | ||
1.一种用于预防和/或治疗猪腹泻病的蛋黄抗体的制备方法，其特征在于，所述方法包括：
将猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒和猪丁型冠状病毒分别超滤浓缩后经BEI灭活，获得猪传染性胃肠炎病毒抗原、猪流行性腹泻病毒抗原和猪丁型冠状病毒抗原；
将所述猪传染性胃肠炎病毒抗原、所述猪流行性腹泻病毒抗原和所述猪丁型冠状病毒抗原按体积比为(0.8～1.2)：(0.8～1.2)：(0.8～1.2)混匀获得复合抗原液；后将所述复合抗原液与佐剂混匀，获得油包水型疫苗；
将所述油包水型疫苗免疫商品蛋鸡，收集所产鸡蛋；
清洗所述鸡蛋并分离收集蛋黄液，后在所述蛋黄液中提取获得蛋黄抗体。
2.根据权利要求1所述的一种用于预防和/或治疗猪腹泻病的蛋黄抗体的制备方法，其特征在于，所述BEI的终浓度为4～6mM。
3.根据权利要求1所述的一种用于预防和/或治疗猪腹泻病的蛋黄抗体的制备方法，其特征在于，所述将所述复合抗原液与佐剂混匀，获得油包水型疫苗，包括：
将以重量份数计的95～97份所述复合抗原液与3～5份灭菌吐温-80溶解混匀，获得水相；
将以重量份数计的93～95份注射用白油与5～7份司本-80混匀，加热条件下边加边搅拌至透明为止，并高压灭菌，获得油相；
将所述水相与所述油相以体积比为1：(1.5～2.5)混匀并乳化，获得油包水型疫苗。
4.根据权利要求1所述的一种用于预防和/或治疗猪腹泻病的蛋黄抗体的制备方法，其特征在于，所述油包水型疫苗免疫商品蛋鸡的次数为4～5次。
5.根据权利要求1所述的一种用于预防和/或治疗猪腹泻病的蛋黄抗体的制备方法，其特征在于，所述猪传染性胃肠炎病毒抗原、所述猪流行性腹泻病毒抗原和所述猪丁型冠状病毒抗原的体积比为1：1：1。
6.根据权利要求1所述的一种用于预防和/或治疗猪腹泻病的蛋黄抗体的制备方法，其特征在于，每2周抽样检测所述收集的所产鸡蛋的蛋黄对猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒、猪丁型冠状病毒的中和抗体效价，中和抗体效价均≥1：512时收集蛋黄液。
7.根据权利要求1所述的一种用于预防和/或治疗猪腹泻病的蛋黄抗体的制备方法，其特征在于，所述蛋黄液中提取获得蛋黄抗体，包括：
将所述蛋黄液稀释和灭活，获得灭活蛋黄液；
将所述灭活蛋黄液加入5～7倍体积pH为4.5～5.5的酸化水进行酸化，后进行第一固液分离，获得第一液体；
将所述第一液体灭活后，进行第二固液分离，获得第二液体；
将所述第二液体依次进行浓缩、过滤除菌和灭活，获得蛋黄抗体。
8.一种采用权利要求1-7任一所述方法制备获得的用于预防和/或治疗猪腹泻病的蛋黄抗体。
9.一种用于预防和/或治疗猪腹泻病的蛋黄抗体制剂，其特征在于，包括权利要求8所述的蛋黄抗体。
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