[发明专利]对虾METTL3基因的dsRNA及其应用

说明书

本发明属于生物技术领域，公开了对虾METTL3基因的dsRNA及其应用。本发明首次公开了甲基转移酶蛋白3在调控对虾蜕皮中的应用，以及甲基转移酶蛋白3抑制剂在促进对虾蜕皮中的应用；还提供一种由SEQ ID.NO.5所示的核苷酸序列和其反向互补序列所示的核苷酸序列组成的双链RNA，将该双链RNA注入对虾体内，可以显著提高对虾的蜕皮率，加速蜕皮过程。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及对虾METTL3基因的dsRNA及其应用。

背景技术

包括对虾在内的甲壳动物在其整个生命周期中要经历多次蜕皮过程，而对虾正常的生长、发育以及繁殖都以蜕皮过程的顺利完成为前提条件，蜕皮相关的分子调控机理也是国内外关注的热点问题。根据生长发育阶段的不同，对虾的蜕皮行为主要分为三种：发生在幼体至仔虾阶段的发育变态蜕皮；发生在仔虾至成虾阶段的生长蜕皮；以及雌性个体在交配前发生的生殖蜕皮。无论哪种蜕皮过程，对虾体内都会发生一系列复杂的生理变化，涉及多个基因通路的动态调控，与许多生物学过程密切相关，包括细胞分化、细胞凋亡、蜕皮激素的信号转导等。凡纳滨对虾(学名Litopenaeus vannamei)又称南美白对虾，俗称白脚虾，白虾，分类上隶属于节肢动物门、甲壳纲、十足目、对虾科、对虾属，是一种暖水性甲壳动物，也是全世界最重要的水产养殖虾类之一。

研究表明，生物体内的信使RNA(mRNA)上存在着上百种化学修饰，在真核生物中N6-腺嘌呤(m6A)甲基化修饰是最为常见的一种mRNA转录后化学修饰。在20世纪中期，RNA的m6A甲基化现象首次被发现，指的是腺嘌呤核苷酸在N-6位置上发生甲基化。在动物和植物体内，参与调控m6A甲基化的蛋白主要分为三大类：m6A甲基转移酶、m6A去甲基酶以及m6A结合蛋白，分别发挥甲基化修饰、去甲基化和甲基化位点识别的作用。甲基转移酶蛋白3(METTL3)是RNA甲基转移酶复合体中最为核心的组成成分，它包含一个S-腺苷甲硫氨酸(SAM)结合区域，该区域能够识别RNA中的m6A修饰位点，并且将SAM结合区域的甲基转移到该位点上，从而实现甲基的转移。近年来关于METTL3基因的研究发现，METTL3在动物的生长发育过程中扮演着重要角色。在植物、酵母和哺乳动物细胞中，METTL3的基因沉默会导致mRNA中m6A的完全或接近完全缺失。在小鼠(Mus musculus)中，METTL3基因的缺失使其胚胎干细胞丧失分化能力，且胚胎在早期发育过程中死亡。果蝇(Drosophila melanogaster)缺失METTL3基因后，神经发育紊乱，飞行能力以及性别分化都受到影响。而对虾RNA甲基化相关研究较少，对虾m6A甲基转移酶METTL3基因的序列和表达特征也未见相关报道。

发明内容

本发明第一方面的目的，在于提供甲基转移酶蛋白3(METTL3)在调控对虾蜕皮中的应用。

本发明第二方面的目的，在于提供甲基转移酶蛋白3(METTL3)抑制剂的应用。

本发明第三方面的目的，在于提供一种dsRNA。

本发明第四方面的目的，在于提供编码本发明第三方面的dsRNA的核酸分子。

本发明第五方面的目的，在于提供包含本发明第四方面的核酸分子的表达盒、载体或转基因细胞系。

本发明第六方面的目的，在于提供本发明第三方面的dsRNA、本发明第四方面的核酸分子、本发明第五方面的表达盒、载体或转基因细胞系的应用。

本发明第七方面的目的，在于提供一种产品。

本发明第八方面的目的，在于提供一种促进对虾蜕皮的方法。

为了实现上述目的，本发明所采取的技术方案是：

本发明的第一个方面，提供甲基转移酶蛋白3(METTL3)在调控对虾蜕皮中的应用。

优选地，所述甲基转移酶蛋白3包括甲基转移酶蛋白3蛋白和甲基转移酶蛋白3基因。