[发明专利]一种具有抗多药耐药菌活性的重楼总皂苷提取物及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了具有抗多药耐药菌活性的重楼总皂苷及其制备方法和应用。主要包括提取、分离、纯化和抗菌活性研究。本发明中的重楼总皂苷提取物采用醇提法提取、浓缩和离心对重楼总皂苷进行粗提，进一步通过大孔树脂对重楼总皂苷进行富集纯化，制备工艺简单，重楼总皂苷含量高，生产成本低，适合大规模制备。本发明还提供了重楼总皂苷的在抗大肠杆菌、沙门氏菌、多重耐药金黄色葡萄球菌和多重耐药铜绿假单胞中的应用。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，涉及一种具有抗多药耐药菌活性的重楼总皂苷提取物及其制备方法和应用。

背景技术

重楼为百合科植物云南重楼或七叶一枝花的干燥根茎，又名蚤休、草河车、白甘遂和金线重楼，主产于陕西、云南、广西、四川、贵州、湖北及甘肃等地。性微寒，有小毒，味苦，归肝经。重楼具有清热解毒、消肿止痛和凉肝定惊的功效，主治疔疮痈肿、咽、喉肿痛、蛇虫咬伤、跌扑伤痛和惊风抽搐，是云南白药和宫血宁片等中成药的主要原料之一，具有较高的经济价值。

重楼的主要有效成分重楼皂苷为甾体皂苷，重楼皂苷类成分具有抗肿瘤、免疫调节、抗菌消炎、止血、调节血管和抗氧化等作用。作为具有很高药用价值和经济价值的重楼，对其有效成分的提取变得尤为重要。

目前，重楼中重楼总皂苷的提取方法较多，但大多都采用乙醇溶液回流提取，分离纯化方法复杂，且收率较低。严重阻碍了重楼药材的利用率和重楼皂苷的规模化生产。

发明内容

为了克服上述现有技术的缺点，本发明的目的在于提供本发明提供了一种具有抗多药耐药菌活性的重楼总皂苷及其制备方法和应用，该方法制备工艺简单，重楼总皂苷含量高，生产成本低，适合大规模制备。

为了达到上述目的，本发明采用以下技术方案予以实现：

本发明公开的一种具有抗多药耐药菌活性的重楼总皂苷的制备方法，包括以下步骤：

1)取重楼药材或饮片，粉碎后过筛，浸入乙醇溶液中过夜，回流提取2～3次，每次1～3小时，过滤，合并提取液；

2)将提取液浓缩至1/4体积，离心，得到上清液A和沉淀A，将沉淀A加入乙醇溶液中，搅拌混匀后离心，得到上清液B和沉淀B，将沉淀B洗涤、干燥；

3)将上清液A和上清液B合并，将合并后的上清液与干树脂按照1:5-1:10的质量比混合后装层析柱，采用5～10倍体积的水进行洗脱，弃去洗脱液，再用4～8倍量的80％～90％乙醇进行洗脱，收集乙醇洗脱液，对乙醇洗脱液浓缩，然后与步骤2)处理后的沉淀B合并、干燥，制得重楼总皂苷。

优选地，步骤1)中，所用乙醇溶液的浓度为60％～90％，所用乙醇溶液的用量为重楼药材或饮片质量的8～24倍。

优选地，步骤2)中，所用乙醇溶液的浓度为60％～80％，所用乙醇溶液的用量为沉淀A质量的4～10倍。

优选地，步骤3)中，所用干树脂选择AB-8、LX-T5、D101或LX-100B。

优选地，以质量百分比计，重楼总皂苷中含有0.12％-0.14％的重楼皂苷Ⅱ、0.06％-0.11％的重楼皂苷Ⅵ以及0.11％-0.15％重楼皂苷Ⅶ。

优选地，步骤3)中，上柱流速为1-3BV/h；大孔树脂水洗脱液的用量为大孔树脂装柱体积的5-10倍量。

本发明还公开了采用上述的制备方法制得的具有抗多药耐药菌活性的重楼总皂苷。

本发明还公开了上述的具有抗多药耐药菌活性的重楼总皂苷在制备抗菌药物中的应用。

优选地，所述抗菌药物包括抗大肠杆菌、沙门氏菌、多重耐药金黄色葡萄球菌222和多重耐药铜绿假单胞174的药物。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：