[发明专利]子宫内膜癌早期筛查诊断用标志物、引物探针及试剂盒

权利要求书

1.子宫内膜癌早期筛查诊断用检测引物和探针，其特征在于，包括以下至少一组或多组目标基因甲基化区域检测用引物和探针，具体核苷酸序列如下所示：

CDO1基因中：

Chr5:115816884-115817037对应检测引物为SEQ ID NO:1～2，探针：SEQ ID NO:3，

Chr5:115816018-115816152对应检测引物为SEQ ID NO:4～5，探针：SEQ ID NO:6，

Chr5:115815760-115815872对应检测引物为SEQ ID NO:7～8，探针：SEQ ID NO:9；

CELF4基因中：

Chr18:37566573-37566662对应检测引物为SEQ ID NO:10～11，探针：SEQ ID NO:12，

Chr18:37565524-37565639对应检测引物为SEQ ID NO:13～14，探针：SEQ ID NO:15，

Chr18:37565036-37565173对应检测引物为SEQ ID NO:16～17，探针：SEQ ID NO:18；

HAND2基因中：

Chr4:173530858-173530953对应检测引物为SEQ ID NO:19～20，探针：SEQ ID NO:21，

Chr4:173530225-173530335对应检测引物为SEQ ID NO:22～23，探针：SEQ ID NO:24，

Chr4:173528847-173528958对应检测引物为SEQ ID NO:25～26，探针：SEQ ID NO:27；

HS3ST2基因中：

Chr16:22813813-22813928对应检测引物为SEQ ID NO:28～29，探针：SEQ ID NO:30，

Chr16:22814029-22814146对应检测引物为SEQ ID NO:31～32，探针：SEQ ID NO:33，

Chr16:22814452-22814557对应检测引物为SEQ ID NO:34～35，探针：SEQ ID NO:36。

2.根据权利要求1所述的引物和探针，其特征在于，探针的5’端标记荧光基团，3’端标记淬灭基团，且同一检测体系中不同的标志物基因检测探针标记不同的荧光基团。

3.子宫内膜癌早期筛查诊断用检测试剂盒，其特征在于，包括权利要求1或2所述的引物和探针。

4.根据权利要求3所述的子宫内膜癌早期筛查诊断用检测试剂盒，其特征在于，还包括内参基因检测引物和探针，所述内参基因为GAPDH，内参基因检测引物的核苷酸序列如SEQID NO:37～38所示，内参基因检测探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:39所示，内参基因检测探针的核苷酸序列5’端标记荧光基团，3’端标记淬灭基团，同一检测体系中内参基因检测探针标记的荧光基团与标志物基因检测探针标记的荧光基团不同。

5.根据权利要求3所述的子宫内膜癌早期筛查诊断用检测试剂盒，其特征在于，还包括PCR反应液，和样本甲基化前处理试剂；所述样本为宫颈脱落细胞，所述样本甲基化前处理试剂包括细胞基因组DNA提取试剂和DNA重亚硫酸盐转化试剂。

6.根据权利要求5所述的子宫内膜癌早期筛查诊断用检测试剂盒，其特征在于，PCR反应液每一人份由浓度1U/μL的甲基化特性的Taq DNA聚合酶0.5～1μL、浓度10mM的dNTPs2～5μL、浓度2～5mM的Mg²⁺2～6μL、10×DNA聚合酶buffer 5μL和纯化水补足15μL组成。