[发明专利]促进金铁锁毛状根愈伤组织产花青素的培养基及诱导方法

权利要求书

1.一种促进金铁锁毛状根愈伤组织产花青素的培养基，其特征在于，包括：魔芋培养基，其中，每升魔芋培养基包括：魔芋粉2.7-8.7g、铁粉0.10-0.30g、硝酸钾1.5-2.0g。

2.一种促进金铁锁毛状根愈伤组织产花青素的诱导方法，其特征在于，包括下述过程：

1)诱导愈伤组织：以加入0.01-0.05％乙酰丁香酮孵育30min的Ar.A4菌液和金铁锁无菌苗在魔芋培养基上22-25℃，黑暗条件下共培养12-14h，然后用0.6-0.8％头孢噻肟钠除菌，转移到魔芋培养基上诱导产生毛状根；将诱导出的毛状根切下转移到魔芋培养基增殖培养，然后转移到魔芋培养基上诱导愈伤组织；

2)诱导花青素：将步骤1)所得愈伤组织置于魔芋培养基中，每升魔芋培养基中加入6-BA 1-3mg、IAA 0.1-2mg、KT 0.1-1mg和0.01％Ge-132，在光照条件为2500-3000Lx下，22-25℃培养15d；

3)继代培养：将含有花青素的愈伤组织转入魔芋培养基中光照2500-3000Lx、22-25℃培养30d，每升魔芋培养基中加入6-BA 1-3mg、IAA0.1-2mg、KT 0.1-1mg和0.01％Ge-132，使花青素大量积累；

4)提取花青素：以提取剂提取步骤3)所得的愈伤组织中的花青素。

3.根据权利要求2所述的一种促进金铁锁毛状根愈伤组织产花青素的诱导方法，其特征在于，步骤1)中，所述Ar.A4菌液OD₆₀₀为0.6-0.8。

4.根据权利要求2所述的一种促进金铁锁毛状根愈伤组织产花青素的诱导方法，其特征在于，步骤1)中，所述诱导为将增殖后的毛状根捏成团，接种到魔芋培养基中进行诱导，每升魔芋培养基中加入2,4-D1-3mg和6-BA1-2mg。

5.根据权利要求2所述的一种促进金铁锁毛状根愈伤组织产花青素的诱导方法，其特征在于，步骤4)中，所述提取剂为盐酸-甲醇提取剂，且浓度为1-3％。

6.根据权利要求2所述的一种促进金铁锁毛状根愈伤组织产花青素的诱导方法，其特征在于，步骤4)中，提取花青素时料液比为1:10～1:50，提取时间为5-20h，提取温度为4-50℃。

7.一种促进金铁锁毛状根愈伤组织中花青素积累的培养基，其特征在于，在所述魔芋培养基的基础上，每升魔芋培养基中加入6-BA 1-3mg、IAA0.1-2mg、KT 0.1-1mg和0.01％Ge-132。