[发明专利]一种用于诊断消化系统肿瘤的分子标志物及试剂盒

说明书

本发明公开了一种用于诊断消化系统肿瘤的分子标志物及试剂盒，尤其是L3MBTL4基因启动子区DNA甲基化作为分子标志物在制备诊断消化系统肿瘤产品中的应用。本发明首次通过MSP的方法在胰腺癌、肝癌、胃癌和食管癌中发现L3MBTL4启动子区频繁发生高甲基化，并发现L3MBTL4参与DNA损伤修复的NHEJ通路，L3MBTL4甲基化是CHK1抑制剂结合顺铂等化疗药物杀伤肿瘤细胞的协同致死标志物。本发明还提供了用于检测L3MBTL4基因启动子区甲基化状态的引物、试剂盒。应用本发明引物、试剂盒来检测L3MBTL4基因启动子区高甲基化状态可作为胰腺癌、肝癌、胃癌和食管癌诊断、疗效观察、预后判断、微小残留病检测等的有力手段，而且，操作简便、稳定性好，具有深远的临床意义和推广性。

技术领域

本发明涉及生物技术领域。更具体地，涉及一种用于诊断消化系统肿瘤的分子标志物及试剂盒。

背景技术

胰腺癌是一种恶性程度很高的消化道恶性肿瘤，5年生存率不到10％，被称为“癌中之王”。近年来，胰腺癌发病率和死亡率呈持续上升趋势，预计到2030年将成为全球第二位的致死性肿瘤。中国国家癌症中心2017年数据显示，胰腺癌居我国男性恶性肿瘤发病率的第7位，女性第11位，位于恶性肿瘤相关死亡率的第6位。胰腺癌起病隐匿，早期症状不典型，就诊时多已进展至晚期，多数已失去手术机会。对于可切除的胰腺癌患者，术后复发风险也较高，部分患者术后早期即出现局部复发或远处转移。国内数据显示2016-2019年期间3279例胰腺癌切除术后患者，9个月内复发率为45.87％(赵玉沛,中国胰腺癌诊治指南(2021).中国实用外科杂志,2021.7)。Groot等分析957例胰腺癌术后患者，51.5％的患者在术后一年内出现局部复发或远处转移(Groot,V.P.,et al.,Defining and PredictingEarly Recurrence in 957Patients With Resected Pancreatic DuctalAdenocarcinoma.Ann Surg,2019.269(6):p.1154-1162.)。

原发性肝癌是世界范围内常见的恶性肿瘤之一，其发病率在2018年全球恶性肿瘤中排名第6位，是第4位肿瘤致死原因。75％-85％的病例的原发性肝癌中为肝细胞癌，简称肝癌。中国是肝癌大国，全球约一半的新发病例发生在中国，每年有30万-40万人死于肝癌。在我国，慢性乙肝-肝硬化是导致肝癌的主要原因。肝脏没有痛觉神经，癌变早期没有明显症状，少数病人会出现肝区疼痛、食欲减退、上腹不适、乏力等，多数肝癌患者确诊时已处于中晚期，失去最佳救治机会。

胃癌是我国最常见的消化道恶性肿瘤，预后较差，5年总体生存率为35.1％，严重危害人民健康。据统计，2020年全球胃癌新发病例和因胃癌死亡病例分别居第五位和第四位，其中43.9％发病病例和48.6％死亡病例发生在中国。幽门螺旋杆菌感染是胃癌最重要的危险因素。大部分胃癌患者早期症状不典型，可出现腹痛、乏力、消瘦等症状，确诊时多已进展至晚期。

食管癌是我国高发的恶性肿瘤之一，在我国恶性肿瘤死亡原因中排名第四位。2020年我国食管癌发病人数达32万，死亡人数30万，均占全球的55％左右。食管癌有明显的地域和人群分布，我国主要分布于太行山区，提示环境是食管癌发病的危险因素。食管癌分为鳞癌和腺癌，在我国，90％左右的食管癌为鳞癌。手术是食管癌最有效的治疗方式，但由于早期症状不典型，多数确诊时已进入中晚期，失去手术机会。因此，发现高敏感性和特异性的早期诊断方法，以及寻找可治疗的靶点，对改善上述恶性肿瘤的疗效和预后具有重要的意义。