[发明专利]一种去甲基伊托必利亚硝胺的检测方法

说明书

本发明提供了一种盐酸伊托必利中的杂质去甲基伊托必利亚硝胺的检测方法，选择十八烷基硅烷键合硅胶作为填充剂，乙酸铵水溶液和乙腈作为流动相进行液相色谱分离，并联用质谱对目标分子进行检测。该方法系统适用性、专属性、精密度、定量限和检测限以及线性和范围均符合要求，分离效果好，操作简便，方法灵敏度高。

技术领域

本发明涉及药物分析技术领域，具体涉及一种去甲基伊托必利亚硝胺的检测方法。

背景技术

伊托必利是一种可口服制剂的胃动力促进药物，最早由北陆制药株式会社研发。其标准命名为N-[4-[2-(N ,N-二甲基氨基）乙氧基]苄基]-3 ,4-二甲氧基苯甲酰胺（CAS号：122892-31-3），化学结构式如下所示：。在伊托必利的制备流程中，不可避免的会产生各类杂质。经过研究发现了其中的一种杂质，去甲基伊托必利亚硝胺。它的标准名称为N-[4-[2-(N-亚硝基 ,N-甲基氨基）乙氧基]苄基]-3 ,4-二甲氧基苯甲酰胺，化学结构如下所示：去甲基伊托必利亚硝胺具有N-亚硝基结构。

众所周知，此类亚硝胺结构的化合物大多具有基因毒性，例如NDMA(N-亚硝基二甲胺)，NDEA(N-亚硝基二乙胺)等。因此同样的，为了保证药物的安全性，在生产过程中对去甲基伊托必利亚硝胺进行监测与含量控制是十分关键的。

然而去甲基伊托必利亚硝胺为一新的杂质，现有报道中几乎没有关于它的资料。要对它进行监测几乎没有任何现行技术标准可供参考。

发明内容

为了解决上述去甲基伊托必利亚硝胺的检测分析问题，本公司发明了一种利用LC-MS方法检测去甲基伊托必利亚硝胺的方法，具体为：

一种去甲基伊托必利亚硝胺的检测方法，其特征在于，将供试品溶于溶剂中，并使用液相色谱-质谱联用方法对样品进行分析，所述去甲基伊托必利亚硝胺的结构如下所示。

进一步地，所述色谱仪使用的色谱柱类型为碳十八烷基键合硅胶柱PoroShell120 EC-C18 2.7 μm，4.6×100mm。

进一步地，所述色谱仪的柱温范围为40-50℃。

进一步地，所述色谱仪的流动相由流动相A与流动相B组成，所述流动相A为0.1%甲酸-水（含10mM乙酸铵）。

进一步地，所述方法采用梯度洗脱的方法进行洗脱，所述流动相A与流动相B的比例为4:1~3:7，流速维持在1mL/min。

进一步地，所述溶剂选自乙腈和水中的一种，浓度不高于100ng/mL。

进一步地，所述色谱仪使用的检测器为紫外检测器，检测波长为254nm。

进一步地，所述质谱使用MRM方法检测，条件如下所示：

有益效果：本发明首次提供了一种去甲基伊托必利亚硝胺的检测方法。药品中亚硝胺类化合物的控制是痕量级的，而本发明的方法中质谱条件中裂解电压、驻留时间、碰撞能参数对目标物的响应和峰形有很大的影响，选择合适的参数，可以确保方法有足够的灵敏度，排除其它物质的干扰，能用于检测限度极低的基因毒杂质。该方法系统适用性、专属性、精密度、定量限和检测限以及线性和范围均符合要求，分离效果好，操作检测，方法灵敏度高

具体实施方式

实施例1

去甲基伊托必利亚硝胺的制备，按照下示反应进行。

将约344mg去甲基伊托必利在室温下溶于30mL的1M HCl水溶液，并缓缓加入173mg亚硝酸钠固体，充分搅拌溶解后，室温反应3小时。反应结束后用二氯甲烷萃取，硫酸钠干燥过滤，旋干得去甲基伊托必利亚硝胺固体约296mg。