[发明专利]一种抗MICA的抗体及其应用

说明书

本发明公开了一种抗MICA的抗体及其应用，本发明的抗体具有SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列的重链可变区。本发明还涉及编码抗体的核酸分子、载体、宿主细胞、衍生物与制备方法。本发明的抗体可用于制备MICA的检测试剂盒和治疗肿瘤的药物。

技术领域

本发明属于细胞免疫学、分子生物学领域，涉及一种抗MICA的抗体及其应用。

背景技术

MHC I类多肽相关序列A（MICA）是一种高度多态性的细胞表面糖蛋白，由位于MHC基因座内的MICA基因编码。MICA有应激诱导自身抗原的作用，并作为KLRK1/NKG2D杀伤激活受体的配体。NKG2D-MICA的参与导致T细胞和NK细胞对在其表面表达MICA的上皮肿瘤细胞（或其他应激细胞）的效应细胞溶解反应的激活。作为一种防御机制，肿瘤细胞能够通过二硫键异构酶（ERp5）和ADAM（去整合素和金属蛋白酶）和靶向膜近端α3结构域的MMP（基质金属蛋白酶）蛋白酶的合作，水解脱落表面表达的蛋白质来避免免疫系统对MICA的识别。肿瘤患者血清中高水平的MICA与肿瘤大小和预后不良呈正相关。因此，开发抗MICA抗体，将其结合于MICA上接近ERp5结合位点的区域和/或将MICA保留在细胞表面处以使得该MICA可高效地接合NKG2D，从而引起患者中的抗肿瘤活性增强。

发明内容

本发明提供了一种抗MICA的抗体或其抗原结合部分，其包含含CDR1、CDR2和CDR3序列的重链可变区，其中，重链可变区的CDR1包含SEQ ID NO.1所示的序列中的CDR1或其保守修饰形式的氨基酸序列；重链可变区的CDR2包含SEQ ID NO.1所示的序列中的CDR2或其保守修饰形式的氨基酸序列；重链可变区的CDR3包含SEQ ID NO.1所示的序列中的CDR3或其保守修饰形式的氨基酸序列。

具体地，重链可变区的CDR1序列如SEQ ID NO.2所示，重链可变区的CDR2序列如SEQ ID NO.3所示，重链可变区的CDR3序列如SEQ ID NO.4所示。

进一步，本发明的抗MICA的抗体或其抗原结合部分还包含SEQ ID NO.1所示的重链可变区中的框架区FR1-FR4。

进一步，本发明的抗MICA的抗体或其抗原结合部分包含SEQ ID NO.1所示的重链可变区或与SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列具有至少80%同源性的氨基酸序列。

本发明的所述抗体选自下组：单克隆抗体、单链抗体、嵌合抗体、人源化抗体和全人源抗体。

在本发明的具体实施例中，所述抗体是纳米抗体。

本发明还提供了编码前面所述的抗MICA的抗体或其抗原结合部分的核酸分子。

可以使用标准分子生物学技术来获得本发明的核酸分子。一旦获得编码VH区段的DNA片段，进一步通过标准重组DNA技术操作这些DNA片段，以例如将可变区基因转变为全长抗体链基因、或抗原结合部分DNA片段。在这些操作中，将编码VH的DNA片段可操作的连接至编码另一蛋白质，诸如抗体恒定区或柔性接头的另一DNA片段。术语“可操作的连接”在用于本文时意图表示连接两DNA片段从而使得这两个DNA 片段所编码的氨基酸序列保持在同一读码框中(in-frame)。

通过将编码VH的DNA可操作的连接至编码重链恒定区(CH1、CH2和 CH3)的另一DNA分子可以将编码VH区的分离的DNA转变为全长重链基因。人重链恒定区基因的序列是本领域已知的。

本发明还提供了包含所述核酸分子的载体。

本发明还提供了包含前面所述的核酸分子或前面所述的载体的宿主细胞。

可用于本发明的载体包括质粒、表达载体、克隆载体、病毒载体等。可选用本领域已知的各种载体。比如，选用市售的载体，然后将编码本发明的抗体的核苷酸序列可操作地连于表达调控序列，可以形成表达载体。