[发明专利]一种烙铁头SVMP蛋白特异性短肽、抗烙铁头SVMP蛋白抗体和蛇伤检测试剂盒

说明书

本发明提供了一种烙铁头SVMP蛋白特异性短肽、抗烙铁头SVMP蛋白抗体和蛇伤检测试剂盒，属于抗体及免疫检测技术领域。一种烙铁头SVMP蛋白特异性短肽，氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。采用所述短肽筛选得到的抗烙铁头SVMP蛋白单克隆抗体SVMP‑mc18与烙铁头天然SVMP蛋白具有较高的特异性亲和能力。由SVMP蛋白单克隆抗体制成的蛇伤诊断试剂盒，能够用于诊断蛇伤是否被烙铁头咬伤，并且以抗体抗原免疫反应为检测诊断基础，大大提高了蛇伤诊断效率和结果准确性。

技术领域

本发明属于抗体及免疫检测技术领域，具体涉及一种烙铁头SVMP蛋白特异性短肽、抗烙铁头SVMP蛋白抗体和蛇伤检测试剂盒。

背景技术

烙铁头蛇，学名原矛头蝮(学名:Trimeresurus mucrosquamatus)，是亚洲攻击性最强的蛇类之一，也是中国十大毒蛇之一，具有体型小、毒性强的特点。

目前辨认毒蛇咬伤的方法在现有临床上主要依靠家属或病人对毒蛇图册的指认、临床表现和蛇牙痕等主要方法鉴别，该类方法诊断误差非常大。有大量病例因未能鉴别出咬伤蛇种，延误了宝贵的治疗窗口时间，而死亡。以抗体抗原免疫反应为检测诊断基础，能够大大提高蛇伤诊断效率。目前我国抗蛇毒血清种类较少，抗血清品种无法覆盖所有剧毒蛇种。而蛇毒所含毒性成分十分复杂，主要包括酶、神经毒性多肽、生物活性因子和膜活性多肽。针对烙铁头蛇的蛇毒还没有检测生物标志物的报道，这严重阻滞了烙铁头蛇伤快速检测。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种烙铁头SVMP蛋白特异性短肽，能够用于特异性筛选SVMP蛋白单克隆抗体。

本发明的目的还在于提供一种抗烙铁头SVMP蛋白抗体和蛇伤检测试剂盒，实现烙铁头蛇伤快速诊断。

本发明提供了一种烙铁头SVMP蛋白特异性短肽，所述短肽的氨基酸序列如SEQ IDNO:1所示。

本发明提供了一种由所述短肽筛选得到的抗烙铁头SVMP蛋白单克隆抗体SVMP-mc18，所述单克隆抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示，所述单克隆抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：3 所示。

本发明提供了一种烙铁头蛇伤ELISA检测试剂盒，包括包被抗烙铁头 SVMP蛋白的多克隆抗体的固相载体、酶标记的所述抗烙铁头SVMP蛋白单克隆抗体SVMP-mc18。

优选的，所述抗烙铁头SVMP蛋白多克隆抗体是用从烙铁头蛇毒中分离纯化的SVMP蛋白免疫动物制备得到。

优选的，所述烙铁头SVMP蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO：4所示。

优选的，所述固相载体中抗烙铁头SVMP蛋白的多克隆抗体的包被浓度为1～100μg/ml。

优选的，所述检测试剂盒还包括洗涤液、样品稀释液、底物、显色液和阳性标准品。

优选的，所述阳性标准品包括分离纯化的SVMP蛋白或所述烙铁头 SVMP蛋白特异性短肽。

本发明提供的烙铁头SVMP蛋白特异性短肽，氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。SVMP蛋白在多种蛇毒中均存在，经过比对发现不同来源的蛇毒 SVMP蛋白存在保守区和高变区，本发明提供的SVMP蛋白短肽为烙铁头蛇毒中特异性存在的，采用所述短肽筛选烙铁头SVMP蛋白单克隆抗体能够实现烙铁头蛇伤的特异性检测。