[发明专利]一种鱼类负相关性状的选育方法

权利要求书

1.一种鱼类负相关性状的选育方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)针对鱼类生长和环境抗逆性这对负相关性状，拟合发育时期和环境抗逆性的关系，确定抗逆性发育敏感时期和抗逆选育参数；

(2)根据所述抗逆选育参数进行高浓度急性胁迫致死筛选，淘汰对环境胁迫耐受性差的个体；

(3)常规环境下养殖留存的鱼类个体，待大小合适时植入PIT鱼类芯片；

(4)在低浓度慢性胁迫环境下选留生长快的个体，同时选取抗逆主效基因作为对抗逆性的评价指标检测，淘汰其中基因表达水平异常的个体；

确定所述抗逆性发育敏感时期和抗逆选育参数，步骤如下：

(1-1)96h环境碱胁迫实验：按体质量从小到大选取至少5种规格的鱼，对每种规格的鱼设定相应至少3个环境胁迫梯度，先将鱼暂养于无环境胁迫的对照水体，然后将鱼直接放入不同环境胁迫的水体内，每组40尾鱼，设3个平行，进行96h急性胁迫实验；实验开始后每4h观察记录死亡情况，期间保持状态稳定，不喂食，用虹吸管吸出粪便以保持水体清洁，以鱼静卧水箱底部，呼吸停止，用玻璃棒触碰无反应为死亡标准；

(1-2)用互补重对数模型拟合不同环境胁迫处理下不同规格的鱼各时间区间的累计死亡率曲面，并分别计算每种规格的鱼对应的96h半致死浓度；

(1-3)根据上述每种规格的鱼对应的96h半致死浓度，用Logistic回归模型拟合发育时期和96h半致死浓度的关系曲线；

(1-4)根据上述关系曲线确定抗逆性发育敏感时期，设定抗逆选育参数；

所述抗逆选育参数包括选育鱼龄、鱼体重、选育胁迫强度、胁迫期间；

所述互补重对数模型拟合采用DPS数据处理系统；

所述抗逆主效基因包含热休克蛋白、3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶、24脱氢胆固醇还原酶、血小板源性生长因子、生长分化因子15、miRNA-26a、miRNA-30c和miRNA-204。

2.根据权利要求1所述鱼类负相关性状的选育方法，其特征在于，所述PIT鱼类芯片的直径为2.05mm、长度为12.05mm和平均质量为0.094g。

3.根据权利要求1所述鱼类负相关性状的选育方法，其特征在于，所述体质量不超过30g。

4.根据权利要求1至3任一项所述鱼类负相关性状的选育方法，其特征在于，所述鱼类选自尼罗罗非鱼。