[发明专利]敲除或沉默蜂巢小甲虫气味结合蛋白基因1在防治蜂巢小甲虫中的应用

说明书

本发明公开了敲除或沉默蜂巢小甲虫气味结合蛋白基因1在防治蜂巢小甲虫中的应用。所述的蜂巢小甲虫气味结合蛋白基因1的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明采用RNA干扰技术，用dsRNA沉默蜂巢小甲虫OBP1基因的，能影响蜂巢小甲虫对食物源花粉挥发物的选择，可以用于防治蜂巢小甲虫，在蜂巢小甲虫防治过程中具有重要作用。

技术领域

本发明属于昆虫防治领域，具体涉及敲除或沉默蜂巢小甲虫气味结合蛋白基因1在防治蜂巢小甲虫中的应用。

背景技术

蜂巢小甲虫是一种寄生在蜂群内的害虫，原分布于非洲南部，随后扩散至澳洲、美洲、亚洲等各州多个国家，在世界各地均引起不同程度的蜂群危害和经济损失。蜂巢小甲虫在幼虫期和成虫期对蜜蜂造成严重的危害，它们取食花粉、蜂蜜和蜜蜂幼虫，因而会导致蜜蜂幼虫死亡、蜂蜜发酵和巢脾损毁，常造成整个蜂巢坍塌、蜂群弃巢飞逃。目前对其防治主要依靠化学防治，然而长期施用化学杀虫剂导致一系列问题，如环境污染，抗药性产生和对非靶标生物的危害等。因此，开发新型、可替代化学防治的方法变得极其紧迫。

RNA干扰(RNA interference,RNAi)是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA(double-stranded RNA，dsRNA)引发的特异性转录后基因沉默现象。由于该技术对靶基因的高效性、特异性及易操作性等特点，已经在基因功能研究、基因治疗药物的开发及作物病虫害的防治方面展示了广阔的应用前景。

发明内容

本发明的目的是提供敲除或沉默蜂巢小甲虫气味结合蛋白基因1在防治蜂巢小甲虫中的应用，所述的蜂巢小甲虫气味结合蛋白基因1的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

本发明通过实验发现，注射dsGFP的蜂巢小甲虫对两种花粉挥发物均具有明显的吸引效果，但是沉默OBP1后，蜂巢小甲虫对花粉挥发物的吸引力下降。

因此敲除或沉默蜂巢小甲虫气味结合蛋白基因1可以用于防治蜂巢小甲虫。

优选，所述的防治蜂巢小甲虫是降低蜂巢小甲虫对花粉挥发物的吸引力。

优选，所述的花粉挥发物是亚麻酸乙酯或棕榈酸乙酯。

优选，所述的沉默蜂巢小甲虫气味结合蛋白基因1，用于沉默的dsRNA的序列如SEQID NO.2所示。

本发明采用RNA干扰技术，用dsRNA沉默蜂巢小甲虫OBP1基因的，能影响蜂巢小甲虫对食物源花粉挥发物的选择，可以用于防治蜂巢小甲虫，例如防治蜂巢小甲虫的制剂，在蜂巢小甲虫防治过程中具有重要作用。

附图说明

图1是OBP1基因的沉默效率；

图2是沉默OBP1后小甲虫对花粉挥发物的影响。

具体实施方式

下面结合实施案例对本发明进行进一步的阐述，但不是对本发明的限制。

实施例1：蜂巢小甲虫气味结合蛋白基因1(OBP1)的序列及其dsRNA的获得

1、蜂巢小甲虫气味结合蛋白基因1(OBP1)的序列获得

1)蜂巢小甲虫OBP1基因序列在蜂巢小甲虫转录组数据库的搜索

基于蜂巢小甲虫转录组数据库，采用生物信息学方法对蜂巢小甲虫OBP1基因的序列进行搜索，经过序列分析及比对后，共获得1条蜂巢小甲虫OBP1基因的序列。

2)PCR扩增所需引物设计：