[发明专利]一株嗜盐四联球菌及其在生产抗癌胞外多糖中的应用

说明书

本发明涉及功能微生物筛选与应用技术领域，具体提供了一种嗜盐四联球菌(Tetragenococcus halophilus)及其在生产抗癌胞外多糖中的应用。所述嗜盐四联球菌是从东北自然发酵豆酱中分离筛选得到，保藏号为CGMCC No.23137，能高产胞外多糖，并且具有产糖周期短、安全无毒副作用的优点。该菌株所产胞外多糖能显著抑制人肝癌细胞增殖，诱导细胞调亡，有望开发成新的抗癌天然药物。

技术领域

本发明涉及功能微生物筛选与应用技术领域，具体涉及一株嗜盐四联球菌及其在生产抗癌胞外多糖中的应用

背景技术

在中国，癌症仍然是疾病死因之首，发病率与死亡率还在每年爬升，根据国家癌症中心发布的2021年中国癌症统计数据，2021年中国估量有万例新发肿瘤病例和死亡病例，肝癌作为仅次于肺癌、结肠癌和胃癌的第4类癌症相关致死原因,仍然是我国发病率和死亡率较高的常见肿瘤。目前临床上的手术治疗主要适用于早期癌症患者，晚期患者则常采用化疗和放疗进行治疗，但是目前临床上的大部分化疗药物都带有极大的机体损伤副作用，所以对于治疗癌症急需一个更有效的方法。

胞外多糖是乳酸菌在其生长和代谢过程中产生和分泌的水溶性长链多糖，乳酸菌胞外多糖除了可以调节肠道菌群，提高机体免疫能力，抑制腐败菌滋生外，还具有多种潜在的生物活性，包括抗氧化、抗炎、调节肠道菌群、抗肿瘤、免疫调节和抗菌等。

以生物活性物质作为预防癌症和抗癌药物研发已经逐渐成为热点，以生物活性肽为代表的的一系列活性药物作为分子量小，靶向性高，毒副作用小，在癌症临床治疗上具有重要的研究价值。近年来，很多微生物多糖也被证明对癌症有一定的抑制作用，由于基本无细胞毒性，成为食品科学、天然药物等领域的研究热点之一，具有广阔的应用前景。在乳酸菌抗肿瘤方面，已有多篇研究证实乳酸菌菌株及其分泌成分通过激活 caspases原、下调抗凋亡蛋白Bcl-2和上调促凋亡蛋白Bax对癌细胞发挥抗增殖和促凋亡作用。因此，筛选具有抑制癌细胞功能的益生菌胞外多糖及其高产菌株是目前社会的研究热点。本发明针对极限菌种嗜盐四联球菌筛选新型胞外多糖生产菌株，期望提高嗜盐四联球菌胞外多糖的品质和产量，丰富可利用乳酸菌胞外多糖种类，拓展抗癌细胞药物类型，具有广阔的应用前景。

发明内容

本发明的目的是提供一种嗜盐四联球菌(Tetragenococcus halophilus)及其在生产抗癌胞外多糖中的应用。所述嗜盐四联球菌筛选自东北自然发酵的豆酱，能高产胞外多糖。所述胞外多糖能显著抑制人肝癌细胞增殖，诱导细胞调亡，有望开发成新的抗癌天然药物。

本发明一方面涉及一种嗜盐四联球菌，命名为嗜盐四联球菌SNTH-8(Tetragenococcus halophilus SNTH-8)，已于2021年8月12日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101)，保藏号为CGMCC No.23137。

本发明一方面涉及嗜盐四联球菌SNTH-8在制备发酵食品、保健品或药品中的应用。

本发明还涉及嗜盐四联球菌SNTH-8在胞外多糖生产中的应用。

本发明还涉及一种胞外多糖的生产方法，包括将嗜盐四联球菌SNTH-8接种于液体产糖培养基中进行发酵的步骤。

所述胞外多糖的生产方法，包括如下步骤：

(1)将活化后的嗜盐四联球菌SNTH-8按2％(v/v)的接种量接种到液体产糖发酵培养基中，在30℃、160rpm条件下摇瓶培养48h，得种子液；

(2)将种子液接入50L发酵罐中，内有液体产糖发酵培养基30L，在温度30℃，转速160rpm，空气流速比1:0.55,罐压0.12kg/cm2的条件下发酵72h，得发酵液；

(3)以转速10000×g离心20min去除发酵液中的菌体，得到发酵上清液；