[发明专利]一种马的胚胎移植方法

权利要求书

1.一种马的胚胎移植方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、供体和受体的选择：选择高育种价值的供体母马和健壮的受体母马，在供体母马发情期内、卵泡直径≥40mm时静脉注射绒促性素，注射量为1000-3000单位/匹；

S2、器材准备：将与胚胎接触的试剂及耗材置于37℃无菌环境中预热6-8小时，并对实验室、无菌操作台、实验器械进行酒精擦拭及紫外线灭菌；

S3、供体和受体的冲洗：对麻醉后的供体母马和受体母马进行冲洗，并保持供体母马和受体母马的外阴及周围清洁、无菌、无水；

S4、胚胎采集：从供体母马体内采集胚胎；

S5、对胚胎清洗：寻找胚胎，并采用洗胚管对胚胎进行清洗；

S6、胚胎检测：将洗好的胚胎置于50倍以上的体视显微镜下，按照检测标准进行胚胎质量鉴定和分级，选择优秀的胚胎备用；

S7、胚胎装管：将优秀的胚胎移入胚胎移植管中；

S8、将胚胎移入受体母马：采用移胚枪将胚胎移入受体母马。

2.根据权利要求1所述的一种马的胚胎移植方法，其特征在于，在所述步骤S1中，选择高育种价值的供体母马是指选择生产性能高、遗传性稳定、无遗传和传染性疾病的母马为供体母马。

3.根据权利要求1所述的一种马的胚胎移植方法，其特征在于，在所述步骤S3中，供体和受体的冲洗，包括以下步骤：

S301、将已禁水禁食10-24小时的供体母马和受体母马，用2ml2%的普鲁卡因麻醉；

S302、用2%的氯铵溶液对供体母马和受体母马外阴及周围。

4.根据权利要求1所述的一种马的胚胎移植方法，其特征在于，在所述步骤S4中，从供体母马体内采集胚胎，包括以下步骤：

S401、技术人员戴无菌手套，将采胚管送入母马子宫中；

S402、向采胚管的气囊充气，使采胚管卡在子宫颈口内；

S403、采胚管放置好后，向母马子宫内灌注采胚液并轻柔子宫；

S404、导出采胚液对子宫冲洗，重复对子宫冲洗5-7次，将采胚液用采胚皿收集，完成冲洗。

5.根据权利要求1所述的一种马的胚胎移植方法，其特征在于，在所述步骤S5中，寻找胚胎，并采用洗胚管对胚胎进行清洗，包括以下步骤：

S501、将采胚皿静止10-20min，待胚胎降至采胚皿的底部，移去上层液，然后将采胚皿置于10-20倍体视显微镜下寻找胚胎；

S502、用洗胚管将胚胎从采胚皿中移入洗胚皿的第一个皿孔中，更换新的洗胚管，并将胚胎从采胚皿的第一个皿孔移入第二个皿孔，如此反复进行7次清洗。

6.根据权利要求5所述的一种马的胚胎移植方法，其特征在于，在所述步骤S501中，寻找胚胎时按从上到下、从左到右的S形路线寻找胚胎，并根据采胚皿底部的横纵线，记录每一枚胚胎所处的坐标方位。

7.根据权利要求1所述的一种马的胚胎移植方法，其特征在于，在所述步骤S7中， 按液体-气体-液体-胚胎-液体-气体-液体的顺序将优秀的胚胎移入胚胎移植管中。

8.根据权利要求1所述的一种马的胚胎移植方法，其特征在于，在所述步骤S8中，采用移胚枪将胚胎移入受体母马，包括以下步骤：

S801、将装好胚胎的移胚管，放入移胚枪内；

S802、操作人员戴无菌手套，将移胚枪送入受体母马子宫中；

S803、缓慢的将移植枪伸入子宫角大弯处，轻柔的插入内芯并推出胚胎，取出移植枪即完成胚胎移植。