[发明专利]ε-聚赖氨酸或其盐酸盐在制备抑制克罗诺杆菌或干预克罗诺杆菌生物被膜药物中的应用

说明书

本发明公开了ε‑聚赖氨酸或其盐酸盐在制备抑制克罗诺杆菌或干预克罗诺杆菌生物被膜药物中的应用。实验结果显示，ε‑聚赖氨酸具有抑制克罗诺杆菌及其生物被膜的形成、清除其成熟生物被膜的作用。本发明采用标准微量肉汤稀释法测定ε‑聚赖氨酸对克罗诺杆菌的抑菌活性，MIC值为0.125～0.25mg/mL，MBC值为0.125～0.50mg/mL；通过结晶紫染色法和扫描电镜观察发现亚抑菌浓度ε‑聚赖氨酸对克罗诺杆菌生物被膜的形成有显著抑制作用，且高浓度ε‑聚赖氨酸能破坏成熟的生物被膜。本发明为ε‑聚赖氨酸在制备抑制克罗诺杆菌或干预其生物被膜药物方面的临床应用提供实验依据，具有良好的应用前景和巨大的潜在价值。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，具体涉及ε-聚赖氨酸或其盐酸盐在制备抑制克罗诺杆菌或干预克罗诺杆菌生物被膜药物中的应用。

背景技术

克罗诺杆菌(Cronobacter spp.)是一种兼性厌氧、周生鞭毛、能运动的革兰氏阴性杆菌，可导致各年龄段人群感染，尤其是对免疫力低下的新生儿及婴幼儿威胁较大，能够引起严重的坏死性小肠结肠炎、败血症和脑膜炎。尽管其感染率低，但感染该菌的婴幼儿病死率高达40％～80％。此外，克罗诺杆菌感染性疾病即使被治愈也会伴有严重的神经系统后遗症，包括脑脓肿、神经发育迟缓、脑积水和四肢瘫痪等。克罗诺杆菌污染源十分广泛，现已从食品、环境及临床标本中检出了该菌。

生物被膜(Biofilm)是一种由非游离细胞所分泌的胞外基质所组成的细菌菌落，是微生物在自然界存在的一种重要方式。生物被膜促进了细菌对外界环境营养物质的摄取，提高了细菌对外界环境的抗逆性，增强了微生物对抗生素、消毒剂、渗透胁迫、热和饥饿等外界环境压力的适应能力。

研究发现克罗诺杆菌在一定条件下可在玻璃、乳胶、硅胶和不锈钢等材料表面形成生物被膜。然而玻璃、乳胶、硅胶和不锈钢等材料广泛使用于食品加工及医疗领域，一旦克罗诺杆菌在上述材料表面形成生物被膜，这将极大地增加人们接触和感染该菌的风险。同时，生物被膜的存在增强了菌体对抗菌药物和消毒剂的抵抗力，使用常规方法难以彻底去除。此外，生物被膜中存在的克罗诺杆菌往往会持续不断的向外界环境释放菌体，从而导致食品和环境中该菌的持续污染，给食品和医疗领域带来灾难性的威胁。

现阶段，国内外学者就克罗诺杆菌的防治策略进行了积极探索，然而相关的研究报道仍然非常有限，提出的方法各有利弊。如采用化学法，由于细菌生物被膜对不同类型的化学消毒剂的敏感性不同，且容易导致化学残留，因此采用化学法具有一定的局限性；如采用超声、施加电磁场、辐照等物理法，由于所采用的物理手段的强度低，并不能有效地抑制细菌生物被膜的形成。因此，迫切需要开发新颖、天然和有效的药物来抑制克罗诺杆菌及其生物被膜。

ε-聚赖氨酸(ε-polylysine，ε-PL)是一种天然存在的阳离子多肽，主要是链霉菌(Streptomyces albulus)产生的次生代谢产物。ε-聚赖氨酸是一种具有25～35个L-赖氨酸残基的聚阳离子肽，该肽通过α-羧基和ε-氨基之间的一个酰胺键相连，分子量通常为2.5～4.5kDa，具有可生物降解、可食用、水溶性好、热稳定高和对人类无毒的特性。目前，尚无ε-聚赖氨酸或其盐酸盐抑制克罗诺杆菌及其生物被膜的报道。

发明内容

本发明的目的在于提供ε-聚赖氨酸或其盐酸盐在制备抑制克罗诺杆菌或干预克罗诺杆菌生物被膜药物中的应用，为进一步开发针对抑制克罗诺杆菌或干预克罗诺杆菌生物被膜的药物提供重要的数据。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

ε-聚赖氨酸或其盐酸盐在制备抑制克罗诺杆菌药物中的应用。

优选的，所述ε-聚赖氨酸或其盐酸盐对于克罗诺杆菌的最低抑菌浓度为0.125～0.25mg/ml。

优选的，所述ε-聚赖氨酸或其盐酸盐对于克罗诺杆菌的最低杀菌浓度为0.125～0.50mg/ml。

为实现上述目的，本发明还提供如下另一技术方案：