[发明专利]一种侧链酯化抗菌肽WLC6及其制备方法和应用

说明书

本发明提供一种侧链酯化抗菌肽WLC6及其制备方法和应用。侧链酯化抗菌肽WLC6，序列为WLKKLKKK(C6)LKKLK(C6)KK，其中C6为正己烷酸。制备方法是：利用标准α螺旋七肽重复序列“abcdefg”为基础，利用Leu和Lys设计出基础序列，对第8位置和第13位置的Lys侧链进行正己烷酸脂酰化修饰，得出侧链酯化抗菌肽WLC6。该抗菌肽WLC6在治疗革兰氏阴性菌和/或革兰氏阳性菌感染性疾病的药物中的应用。其具有高效抑菌活性的同时具有较低的溶血活性及较高的盐粒子稳定性，并通过物理性破膜机制杀死细菌。具有成为高效抗生素替代品治疗包括耐药菌在内的细菌感染的潜力。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种侧链酯化抗菌肽WLC6及其制备方法和应用。

背景技术

自从1929年弗莱明发现青霉素以来，越来越多的抗生素被广泛应用于医药卫生、食品安全和畜牧生产等多个领域。随着抗生素的大量使用甚至是滥用，人类对抗生素的不规范使用最终会导致耐药菌株的不断出现。尤其是新德里金属-β-内酰胺酶(NDM-1)和多重耐药性鲍曼不动杆菌(MRAB)的出现，使全世界面临进入“后抗生素时代”的阶段。目前很多国家已经意识到这个问题的严重性，纷纷开始出台各种政策法规限制抗生素的使用。因此，目前寻找一种高效抗菌、低毒性、无残留和无污染的抗菌药物成了各国科研人员研究的焦点和重点。

抗菌肽(antimicrobial peptides,AMPs)是一类具有广谱抗菌活性、结构多样性的短肽，在脊椎动物中，许多抗菌肽可以为机体提供保护，并在先天免疫系统中起调节作用。与抗生素通常作用于少数特定靶点的作用机理不同，大部分抗菌肽通过物理性吸附并迅速渗透和破坏细菌膜的基本成分来杀死细菌。抗菌肽还可作用于微生物生物合成过程，如DNA、蛋白质、细胞壁合成和蛋白质折叠等来发挥抗菌效果。

目前，三千多种天然抗菌肽已经在动物、植物和微生物中被广泛提取分离鉴定。但天然抗菌肽通常在机体内含量甚微，其分离提纯难度很大。并且天然抗菌肽在生物体内通常起免疫调节的作用，其还面临着直接的生物学活性低，毒性大，稳定性低等缺点，很难直接作为专一的抗生素直接应用于临床。所以利用生物工程手段全新设计具有高效抗菌活性，低毒性和高稳定性的抗菌肽成为一条有效途径，在丰富抗菌肽家族的同时，也为新型抗菌肽制剂研制和开发开辟新道路。

发明内容

基于以上不足之处，本发明提供一种侧链酯化抗菌肽WLC6，解决天然抗菌肽活性低、毒性高、稳定性差等问题。

本发明所采用的技术方案如下：一种侧链酯化抗菌肽WLC6，序列如下：WLKKLKKK(C6)LKKLK(C6)KK，其中C6为正己烷酸，其对第8位置和第13位置的Lys侧链进行正己烷酸脂酰化修饰。

本发明的另一目的是提供一种侧链酯化抗菌肽WLC6的制备方法，如下：利用标准α螺旋七肽重复序列“abcdefg”，其中“a”和“d”位置为疏水性氨基酸，其它位置为亲水性氨基酸为基础，采用Leu和Lys设计出基础序列WLKKLKKKLKKLKKK，进一步的根据α螺旋结构对七肽重复序列第8位置和第13位置的Lys侧链进行正己烷酸脂酰化修饰，增加螺旋分子之间的相互作用，设计出新型侧链酯化抗菌肽WLC6，其序列如下：WLKKLKKK(C6)LKKLK(C6)KK。

本发明的另一目的在于提供如上所述的一种侧链酯化抗菌肽WLC6在治疗革兰氏阴性菌和/或革兰氏阳性菌感染性疾病的药物中的应用。

进一步的，如上所述的革兰氏阴性菌为多重耐药大肠杆菌E.coli HZP73、E.coliHZP74和E.coli CLNP19。

进一步的，如上所述的革兰氏阳性菌为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌。