[发明专利]一种用于氨基糖苷类药物基因突变检测的试剂盒

权利要求书

1.一种用于氨基糖苷类药物基因突变检测的试剂盒，其特征在于：

包括氨基糖苷类药物相关基因MT-RNR1上的两个突变位点m.1494CT和m.1555AG。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：

所述突变位点每个设计1个探针，正义链和反义链方向均可设计，其核苷酸序列如SEQID No.1~ SEQ ID No.2所示。

3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：

所述探针通过与含有m.1494CT和m.1555AG的DNA片段以碱基互补配对原则进行杂交发挥作用。

4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：

所述探针通过检测后会得到两种检测值m和n，通过对m和n值进行计算，可得到mm、mn和nn三种基因分型结果，其中mm和nn代表纯和类型，生物学意义上的正常型或纯合型，需根据实际情况判读属于正常型或纯合型，mn代表杂合型；计算公式如下：

f(t)=(m-n)/(m+n)

当f(t)≈1±0.05时，分型结果为mm；

当f(t)≈-1±0.05时，分型结果为nn；

当f(t)≈0±0.05时，分型结果为mn；

进一步的，对基因分型结果进行聚类，计算公式如下：

f(x)=log2(m/n)；

f(y)=[log2(m)+log2(n)]/2；

然后以f(x)为横轴，f(y)为纵轴进行聚类，根据样本分型结果和聚类数目判断检测结果属于阳性还是阴性。

5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：

所述试剂盒还包括变性混合液、扩增混合液、片段化混合液、沉淀混合液和杂交混合液。

6.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：

所述试剂盒在CNVPLUS®微阵列芯片扫描仪中进行检测使用。

7.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：

包括以下实施步骤：

S1、DNA扩增；

S2、DNA片段化和沉淀；

S3、干燥、重悬及质控；

S4、变性和杂交；

S5、芯片扫描仪检测。