[发明专利]食蟹猴高甘油三酯血症模型的建立方法及其应用

说明书

本发明涉及及非人灵长类实验动物疾病模型技术领域，公开了一种食蟹猴高甘油三酯血症模型的建立方法及其应用。所述方法包括以下步骤：(1)选择年龄为12‑21岁雄性食蟹猴；(2)每日喂养四次，第一次喂养含糖饲料，第二次喂养辅食，第三次喂养青料，第四次喂养含糖饲料；(3)按照步骤(2)的方式喂养一年后，检测相应的指标，筛选出空腹状态血清甘油三酯水平＞1.14mmol/L的食蟹猴；其中，所述喂养辅食为红糖块和饼干交替投喂，每三天交替一次；所述含糖饲料由常规饲料和红砂糖混合得到。该方法采取温和的长期高糖高脂喂养成功建立了食蟹猴高甘油三酯血症模型，可用于新药研发过程中的药效评估。

技术领域

本发明涉及及非人灵长类实验动物疾病模型技术领域，具体涉及一种食蟹猴高甘油三酯血症模型的建立方法及其应用。

背景技术

高脂血症是指脂肪代谢或转运异常所致的血浆中1种或多种脂质高于正常的疾病，其临床发病率高，常分为高胆固醇(TC)血症、高甘油三脂(TG)血症和混合型高脂血症(即同时表现高TG和高TC血症)。其中，高甘油三酯血症是一种异族性甘油三酯蛋白合成或降解障碍。它是临床实践中最常见的脂质异常之一，尤其是在代谢综合征或2型糖尿病的病人中。甘油三酯高的后果是容易造成“血稠”，即血液中脂质含量过高导致的血液黏稠，在血管壁上沉积，渐渐形成小斑块，即动脉粥样硬化，进而形成局部缺血或血栓。甘油三酯高的后果无论发生在哪个部位，对人体损伤都很严重。如果在心脏，可引起冠心病、心梗；在大脑，可发生脑卒中、中风；发生在眼底，会导致视力下降、失明；如在肾脏，可引起肾衰；发生在下肢，则出现肢体血流不畅导致坏死。根据病因，可将高甘油三酯血症分为两种类型，即原发性与继发性。原发性高甘油三酯血症包括家族性高甘油三酯血症、家族性混合型血脂异常、家族性异常β-脂蛋白血症等。继发性高甘油三酯血症的病因主要包括酒精滥用、肥胖和糖尿病控制失败、某些疾病状态、激素和药物等。目前，高脂血症及其并发症几乎占了全球死亡率的50％，每年造成的经济损失高达1000亿美元。其发病率高、分布广，且呈年轻化趋势。随着我国人口老龄化进程的加快以及饮食结构的改变，血脂异常总体患病率呈快速上升趋势。据报道，2012年中国成人血脂异常患病率40.40％，比较2002年的患病率水平出现大幅度增加，其中高胆固醇血症患病率4.9％，高甘油三酯血症的患病率13.1％，低高密度脂蛋白胆固醇血症的患病率33.9％。呈现为国民血脂异常的普遍暴露状态，这对我国血脂异常防治工作提出更为严峻的挑战。

目前，已建立的高血脂症模型大致可分为饮食诱导、自发及基因修饰等模型，该模型的建立对于高脂血症发病机制及相关药物的筛选研究具有重要意义。大鼠是目前研究高脂血症最常用的动物，能较好地反映多种实验因素对脂质吸收、分解及合成等代谢环节的影响，同时具有成本低、易于饲养、取血量大等优点，因而被作为高脂血症动物模型广泛用于降脂药物的研究。但大鼠的高脂血症与人类高脂血症的发病机制差异较大，如大鼠内源性TC合成量与人类差异较大，大鼠体内TC转运依赖HDL-C，人类体内TC转运则依赖低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)，且大鼠体内TC血浆清除率明显高于人类。另外，大鼠对摄入的高TC食物不敏感，而且还可以通过减少自身肝脏合成TC、并诱导胆固醇7A羟化酶(CYP7A1)表达上调，增加胆汁酸生成等途径而使血浆脂蛋白保持稳定。小鼠容易获得，操作方便，但其血脂代谢与人类差别很大，血浆HDL-C浓度相对较高，LDL-C、VLDL浓度较低，同时缺乏胆固醇转运蛋白。另外，某些种属小鼠(如：C57BL/6J)饮食诱导建模后，TC水平显著升高，而TG增高不明显。家兔作为草食性动物，其血浆脂蛋白谱与人相似，有CETP、肝ApoB100和肠ApoB48的表达，对外源性胆固醇吸收率较高，血中脂质清除率较低。高脂饮食时，血浆TC，LDL-C、VLDL/TC显著升高、HDL-C降低，易形成高脂血症和AS病变。同时，家兔成模速度快，重复性好，成本低，是最早用于高脂血症和AS研究的动物，但家兔血清中LDL在总TC中占比较高，与人差异较大。。