[发明专利]一种鸭精液冷冻保存稀释液

说明书

本发明公开了一种鸭精液冷冻保存稀释液，包括不含甘油的Tris‑卵黄冷冻保存稀释液A和含甘油的Tris‑卵黄冷冻保存稀释液B，每100mL Tris‑卵黄冷冻保存稀释液B中含有：Tris‑碱0.85g、乳糖0.35g、柠檬酸三钠二水0.5g、肌醇0.02g、鸭卵黄10‑25g、甘油1.5‑12mL和2mg/mL的硫酸阿米卡星200μL，余量为水。本发明的Tris‑卵黄冷冻保存稀释液用于雷州黑鸭或其他品种鸭精子冷冻保存能大大提升保存的鸭精液品质，配制及操作简单易行，能有效的提高冻解精子活力，为雷州黑鸭乃至禽类精液冷冻保存、种质资源保存和利用等领域研究提供技术支撑。

技术领域

本发明属于动物繁殖技术领域，具体涉及一种鸭精液冷冻保存稀释液。

背景技术

家禽的精液保存是人工授精技术中的关键环节,该技术水平的高低将直接影响生产过程中的经济效益。精液冷冻保存可以不受限于时间和空间，提高优良种公禽的利用率，促进品种改良等优点。利用冷冻保存技术,可以将精子、卵子、胚胎等置于-196℃的环境中,抑制其新陈代谢,从而进行保存,在需要时再解冻利用。目前因禽类冷冻精液活力低导致受精率极不稳定,只有少数国家建立了禽类精子冷冻库。国内外对家禽精液冷冻保存研究主要集中在鸡上,鸭的研究较少,相关报道也较少。鸭精液通过冷冻可长期保存,这样对精液的使用、选种、杂交改良,打破了精液使用的时空限制,使优秀基因迅速传播。雷州黑鸭是广泛分布于雷州半岛一带，属于黑羽蛋肉兼用型地方鸭，是具有肉质鲜美、产蛋量高、抗病力强、青壳率高和耐粗饲等种质特性的地方优良品种之一。雷州黑鸭精液冷冻保存对品种资源保护具有重要意义,可降低保种费用。目前鸭人工授精使用新鲜或15℃保存2-3天精液，受精率较高，但受时间限制无法广泛使用。鸭精液相比鸡、鹅对低温刺激敏感，冷冻保存后精子活力降低，进而受精率低等问题导致人工授精上无法推广利用。

种公鸭精液质量受很多因素的影响。种公鸭年龄、健康状况、季节气候、精液采集方式等对精液质量的影响较大，进而影响产蛋率和孵化率。雷州黑鸭精液冷冻稀释液和冷冻保存技术方面的研究尚未空白。

发明内容

针对上述现有技术存在的问题，本发明的目的在于提供一种鸭精液冷冻保存稀释液，以提高冻-解精子活力、质膜完整性和存活时间。

本发明的第一个目的是提供一种鸭精液冷冻保存稀释液。

本发明的鸭精液冷冻保存稀释液，包括Tris-卵黄冷冻保存稀释液A和Tris-卵黄冷冻保存稀释液B，所述的Tris-卵黄冷冻保存稀释液A，每100mL中含有：Tris-碱0.85g、乳糖0.35g、柠檬酸三钠二水0.5g、肌醇0.02g、鸭卵黄10-25g和2mg/mL的硫酸阿米卡星200μL，余量为水；所述的Tris-卵黄冷冻保存稀释液B，每100mL中含有：Tris-碱0.85g、乳糖0.35g、柠檬酸三钠二水0.5g、肌醇0.02g、鸭卵黄10-25g、甘油1.5-12mL和2mg/mL的硫酸阿米卡星200μL，余量为水。

优选，所述的Tris-卵黄冷冻保存稀释液A，每100mL中含有：Tris-碱0.85g、乳糖0.35g、柠檬酸三钠二水0.5g、肌醇0.02g、鸭卵黄15-20g和2mg/mL的硫酸阿米卡星200μL，余量为水。

优选，所述的Tris-卵黄冷冻保存稀释液B，每100mL中含有：Tris-碱0.85g、乳糖0.35g、柠檬酸三钠二水0.5g、肌醇0.02g、鸭卵黄15-20g、甘油3-6mL和2mg/mL的硫酸阿米卡星200μL，余量为水。

本发明的稀释液配方中，Tris-碱有很高的缓冲能力，保持精子细胞结构和生理完整性提供保障，维持和调节稀释液pH值；乳糖为精子代谢提供能量；檬酸三钠二水具有良好的pH调节及缓冲性能；肌醇具有促进精子新陈代谢、促进发育功效；鸭卵黄具有保护精子细胞膜和提供能量作用；甘油作为渗透性保护剂，减少冰晶的形成、减轻自由基对细胞的损害、改变细胞膜的通透性；硫酸阿米卡星起到杀菌作用，从而延长精子的存活时间。