[发明专利]蟾酥中11种蟾毒配基类成分的HPLC指纹图谱建立方法及应用

权利要求书

1.蟾酥中11种蟾毒配基类成分的HPLC指纹图谱建立方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）对照品溶液的制备

精密称取伪异沙蟾毒精、日蟾毒它灵、沙蟾毒精、蟾蜍它里定、远华蟾蜍精、蟾毒它灵、脂蟾毒精、南美蟾毒精、蟾毒灵、脂蟾毒配基和华蟾酥毒基对照品粉末适量，分别加入甲醇并溶解，配制为对照品溶液；精密吸取11种对照品溶液，置于容量瓶，加入甲醇定容，配制为混合对照品溶液；

（2）供试品溶液的制备

精密称取蟾酥粉末，置于离心管，加入甲醇，称重后超声提取，超声结束，溶液静置至室温，甲醇补足失重，离心后取续滤液，过滤膜，最终得供试品溶液；

（3）采用HPLC分别测定步骤（1）的对照品溶液和步骤（2）的供试品溶液，并分别得到所述供试品溶液和所述对照品溶液的液相色谱；

（4）将步骤（3）得到的液相色谱导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统分析，得到11种蟾毒配基类成分的HPLC指纹图谱；

步骤（3）中HPLC色谱条件为：采用Agilent InfinityLab Poroshell 120 EC-C18，色谱柱进行梯度洗脱，色谱柱规格3.0×150 mm 2.7-Micron，1000 bar；流动相A为含0.3% 乙酸的水，流动相B为乙腈，波长296 nm，流速0.5 mL/min，柱温30℃，进样量5 μL；

所述的梯度洗脱程序为：

。

2.权利要求1所述的蟾酥中11种蟾毒配基类成分的HPLC指纹图谱建立方法在蟾酥质量评价中的应用。

3.根据权利要求2所述的蟾酥中11种蟾毒配基类成分的HPLC指纹图谱建立方法在蟾酥质量评价中的应用，其特征在于，采用相似性分析、主成分分析或聚类分析处理步骤（4）得到的指纹图谱数据，从而对蟾酥进行质量评价。