[发明专利]一组肺癌相关的miRNA生物标志物及其应用

说明书

本发明涉及分子诊断领域，具体公开了一组肺癌相关的miRNA生物标志物及其应用。该标志物为hsa‑miR‑3714、hsa‑miR‑550a‑3‑5p和hsa‑miR‑4706的组合。本发明通过收集患者与健康人的血清，筛选出hsa‑miR‑3714、hsa‑miR‑550a‑3‑5p、hsa‑miR‑4706三种差异表达的miRNAs，研究其表达差异，与正常人相比，18个肺癌患者血浆中的hsa‑miR‑3714、hsa‑miR‑550a‑3‑5p、hsa‑miR‑4706总体表达水平分别增加了2.14、2.56、2.06倍（P0.05）。因此，本发明提供的与肺癌相关的miRNA标志物组合对肺癌早期筛查有操作简单、高特异性、高灵敏性的特点。

技术领域

本发明涉及分子诊断领域，具体公开了一组肺癌相关的miRNA生物标志物及其应用。

背景技术

2020年中国癌症新增病例457多万例，新增死亡病例301多万例，约占该年全球癌症发病和死亡总数的23.7%和30.2%，均位居全球第一，2020年，中国恶性肿瘤的医疗花费超过2200亿元，给患者家庭和社会带来了沉重的负担。肺癌是当前最常见的恶性肿瘤，发生率和死亡率在所有癌症中居首位。肺癌的早期诊断对于改善病患的生活质量、延长生命，降低社会的医药支出具有重要的社会价值和经济意义。

人体血液中富含人体器官和细胞的代谢产物，癌症的发生与发展的过程中也会一系列生物分子到血液当中。其中，microRNA （miRNA）作为肿瘤标志物对多种恶性肿瘤（癌症）的早期发病与诊治有很好的预警作用，因此寻找一种或者一组高灵敏、特异性的检测miRNA具有重要的医学意义。

发明内容

针对现有技术不足，本发明的目的是提供一组与肺癌相关的miRNA标志物和试剂盒。本发明通过收集患者与健康人的血清，筛选出hsa-miR-3714、hsa-miR-550a-3-5p、hsa-miR-4706三种差异表达的miRNAs，研究其表达差异，将其作为一组与肺癌相关的miRNA标志物组合，并研制出肺癌辅助诊断试剂盒，为肺癌的早期诊断提供数据支持。

本发明包括以下技术方案：

一组肺癌相关的miRNA标志物，该标志物为hsa-miR-3714、hsa-miR-550a-3-5p和hsa-miR-4706的组合。

进一步的，上述一组肺癌相关的miRNA标志物，所述miRNA标志物来源于人类血清。

进一步的，检测上述的一组肺癌相关的miRNA标志物的一组检测引物，所述检测引物包括：

hsa-miR-3714的正向检测引物序列：

SEQ ID NO.1= 5’-CGCAGGGGCCGGGTGCTCACCG-3’；

hsa-miR-550a-3-5p的正向检测引物序列：

SEQ ID NO.2=5’-TGCCTAGGCTGAGACTGCAGTG-3’；

hsa-miR-4706的正向检测引物序列：

SEQ ID NO.3=5’-GGTCCAGAGGGGAGATAGGTTC-3’；

通用反向检测引物序列：

SEQ ID NO.4=5’-GCGAGCACAGAATTAATACGAC-3’。

进一步的，上述的一组检测引物在制备用于肺癌早期诊断的试剂中的应用。

进一步的，一种肺癌早期诊断试剂盒，包含上述一组检测引物。

进一步的，上述一种肺癌早期诊断试剂盒，包括用于PCR反应的酶和试剂。

进一步的，上述一种肺癌早期诊断试剂盒，包括总RNA提取试剂、总RNA加poly(A)试剂、 RT-PCR试剂、定量PCR试剂。