[发明专利]卵巢干细胞在制备卵巢抗衰的药物中的用途

权利要求书

1.卵巢干细胞联合LC-2多肽在制备治疗卵巢早衰的药盒中的用途，其特征在于：所述LC-2多肽的序列如FQGIVQLPYWPSFAMW所示；所述卵巢干细胞采用如下的方法分离培养制备得到：取离体的卵巢组织，PBS冲洗3遍，随后切成0.1*0.1*0.1cm³的组织块，将3倍于组织体积的胶原酶加入皿中，吹打并转移至离心管，放入37℃ 培养箱；消化30min， 每隔10min充分吹打，直至组织块溶解，消化液变浑浊；加入DMEM+10％胎牛血清+1％青霉素、链霉素充分混匀，以1500r/min离心5min，弃上清，加入适量PBS重悬细胞3次，用200目滤网过滤，离心，离心后加入5ml 干细胞培养液于培养皿，37℃、0.5％CO₂的培养箱培养，其中干细胞培养液组成为1000mL：150mL KnockOut血清替代物+10mL HyClone非必须氨基酸+7g谷氨酰胺+1mLβ-巯基乙醇+4mg β-FGF+10mL青霉素-链霉素溶液100X+2mg辅酶Q10，DMEM补足到1000mL；隔天换液；待皿中细胞长到80％汇合度时即消化传代；弃除培养液，加入PBS洗3次，加入0.25％胰酶覆盖皿底，置于37℃培养箱中待大部分贴壁细胞变圆变亮，加入等量含10％胎牛血清的DMEM+10％胎牛血清+1％青霉素、链霉素中止消化，用吸管反复轻柔吹打皿底，使呈单细胞悬液；以1500r／min离心5min，弃上清，加入适量PBS重悬细胞3次，加入前述的干细胞培养液，按1：3的比例传代到P3代，收获集落细胞即为卵巢干细胞。

2.如权利要求1所述的用途，其特征在于所述药盒中还含有药学上可接受的载体。

3.如权利要求2所述的用途，其特征在于所述载体包括赋形剂。