[发明专利]一种用于检测乌司他丁的电致化学发光生物传感器

说明书

本发明公开了一种用于检测乌司他丁的电致化学发光生物传感器，该电致化学发光生物传感器为三明治型传感器，以钛片为基础，钛片直接氧化后分别结合Ab1、乌司他丁和Ab2进行响应，其制备方法包括以下步骤：获得TiO₂NTs、制备Ab2/CC/MNPs、制备Ab2/CC/MNPs/Ab1/TiO₂NTs电极、构建用于检测乌司他丁的电致化学发光生物传感器。本发明的有益之处在于：本发明制备得到的电致化学发光生物传感器对乌司他丁具有检出限低、灵敏度高以及抗干扰性能良好等显著优点，在免疫分析方面有着很好的应用前景。

技术领域

本发明涉及一种生物传感器，具体涉及一种用于检测乌司他丁的电致化学发光生物传感器，属于生物传感器技术领域。

背景技术

乌司他丁又称尿抑制素(Ulinastatin，UTI)，是人体尿液中所含有的一种蛋白酶抑制剂，由若干氨基酸组成，表现出广泛的酶抑制作用。UTI通过抑制各种蛋白质、糖和脂解酶，可有效保护血管内皮和毛细血管的通透性，改善微循环的作用。目前，乌司他丁在中国、韩国、日本和印度被广泛使用。大量令人信服的证据表明，乌司他丁不仅能减少促炎细胞因子的释放，而且对冠心病、心脏瓣膜病、先天性心脏病等进行心脏手术的患者具有重要的器官保护作用。

目前，用来检测乌司他丁的方法很少，主要采用酶标法和放射性碘标记法，此两种方法对设备和检测条件要求都比较高，但灵敏度又不高。因此，我们迫切需要一种新型、简单、快速、具有高灵敏度和高选择性的检测乌司他丁的方法。

发明内容

为解决现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种新型的、具有高灵敏度和高选择性的用于简单、快速检测乌司他丁的电致化学发光生物传感器。

为了实现上述目标，本发明采用如下的技术方案：

一种用于检测乌司他丁的电致化学发光生物传感器，其特征在于，前述电致化学发光生物传感器为三明治型传感器，以钛片为基础，钛片直接氧化后分别结合Ab1、乌司他丁和Ab2进行响应。

前述的用于检测乌司他丁的电致化学发光生物传感器，其特征在于，前述电致化学发光生物传感器是采用如下方法制备而来的：

第1步：获得TiO₂ NTs；

第2步：制备Ab2/CC/MNPs；

第3步：制备Ab2/CC/MNPs/Ab1/TiO₂ NTs电极；

第4步：构建用于检测乌司他丁的电致化学发光生物传感器。

前述的用于检测乌司他丁的电致化学发光生物传感器，其特征在于，在第1步中，采用阳极氧化法获得TiO₂ NTs，具体包括以下步骤：

(1)清洗钛片：将裁剪好的钛片依次在乙醇和超纯水中各清洗5min，然后在由HF、HNO₃和H₂O以体积比1:4:5混合而成的混合酸溶液中继续超声1～5min，再在乙醇和水中各超声5min；

(2)阳极氧化：将清洗干净的钛片浸到质量浓度为0.5％的HF溶液中，在20V的直流电位下，以钛片为阳极，以铂片为阴极，两个电极之间的距离控制在3cm，室温下氧化2h；

(3)煅烧：将经过阳极氧化后的钛片在超纯水中超声清洗，用氮气吹干，然后放入马弗炉中500℃煅烧1h，冷却之后在超纯水中超声1min，4℃保存备用。

前述的用于检测乌司他丁的电致化学发光生物传感器，其特征在于，在第2步中，制备Ab2/CC/MNPs具体包括以下步骤：