[发明专利]与鸡柔嫩艾美耳球虫地克珠利耐药性相关的SNP分子标记及其应用在审
| 申请号： | 202111129903.6 | 申请日： | 2021-09-26 |
| 公开（公告）号： | CN113817842A | 公开（公告）日： | 2021-12-21 |
| 发明（设计）人： | 索勋;刘贤勇;毕菲菲;郝振凯;孙霈;索静霞;于咏兰;余芳 | 申请（专利权）人： | 中国农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888;C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 孙怡 |
| 地址： | 100193 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 柔嫩 艾美耳球虫 克珠利 耐药性 相关 snp 分子 标记 及其 应用 | ||
1.与鸡柔嫩艾美耳球虫地克珠利耐药性相关的SNP分子标记，其特征在于，其含有如SEQ ID NO.1所示序列第166位多态性为A/C的核苷酸序列。
2.根据权利要求1所述的SNP分子标记，其特征在于，所述SNP分子标记的多态性位点为A，对应于地克珠利敏感；多态性位点为C，对应于地克珠利耐药。
3.用于扩增权利要求1或2所述的SNP分子标记的引物对，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ ID NO.2-3所示。
4.含有权利要求3所述引物对的试剂盒。
5.权利要求1或2所述的SNP分子标记或权利要求3所述的引物对或权利要求4所述的试剂盒在检测鸡柔嫩艾美耳球虫地克珠利耐药性中的应用。
6.权利要求1或2所述的SNP分子标记或权利要求3所述的引物对或权利要求4所述的试剂盒在筛选鸡柔嫩艾美耳球虫地克珠利耐药虫株中的应用。
7.权利要求1或2所述的SNP分子标记或权利要求3所述的引物对或权利要求4所述的试剂盒在指导鸡抗柔嫩艾美耳球虫药物使用中的应用。
8.一种检测鸡柔嫩艾美耳球虫地克珠利耐药性的方法，其特征在于，以待测鸡柔嫩艾美耳球虫的DNA或RNA为模板，采用SEQ ID NO.2-3所示引物对进行PCR扩增，根据PCR扩增产物的序列判断待测鸡柔嫩艾美耳球虫是否具有地克珠利耐药性。
9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述PCR扩增的反应程序包括：98℃，30-60s；98℃，15-30s；65℃，20-30s；72℃，25-35s，30-40个循环；72℃，5-10min。
10.根据权利要求8或9所述的方法，其特征在于，若PCR扩增产物中对应于SEQ ID NO.1所示序列第166位的核苷酸序列为A，则待测柔嫩艾美耳球虫为地克珠利敏感虫株，若PCR扩增产物中对应于SEQ ID NO.1所示序列第166位的核苷酸序列为C，则待测柔嫩艾美耳球虫为地克珠利耐药虫株。
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