[发明专利]一株产炭疽霉素的环圈链霉菌及生产方法

说明书

本发明提供了一株产炭疽霉素的极暗黄链霉菌及生产方法，涉及抗生素生产技术领域。本发明所述极暗黄链霉菌YINM00001的保藏编号为GDMCC No.61693。利用所述极暗黄链霉菌YINM00001进行有氧发酵，发酵结束后，发酵液经高效液相色谱分析，发酵液中炭疽霉素浓度为5.67～6.13mg/L。用等体积的乙酸乙酯萃取发酵液三次，真空浓缩得到粗提物，经高效液相色谱检测粗提物，其主要代谢产物含量可达粗提物的1.89～2.04％，经高效液相色谱分析其纯度可达96～98％，具有成本低，过程简单，环境友好，易于大量生产等特点。

技术领域

本发明属于抗生素生产技术领域，具体涉及一株产炭疽霉素的环圈链霉菌及生产方法。

背景技术

近年来，因为微生物具有代谢周期短、反应条件温和、副产物少、立体选择性强等特点，通过微生物发酵来制备目标活性化合物的方法越来越受到人们的重视。在实际生产中，已经有大量的应用实例通过微生物发酵来生产一些具有药用价值或经济价值的化合物。

炭疽霉素(anthracimycin)是2013年首次从海洋放线菌中分离发现的一种聚酮类化合物，它是炭疽杆菌的强效抑制剂，而且对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、粪链球菌等革兰氏阳性菌均具有显著的生长抑制作用。同时，炭疽霉素可作为雷帕霉素靶蛋白(mTOR)抑制剂，能够有效抑制肝癌细胞的增殖。综上所述，炭疽霉素作为药物先导化合物具有较好的研究开发潜力。

目前炭疽霉素的获得主要通过微生物发酵代谢产物的分离纯化，而能够代谢产生炭疽霉素的菌株多为海洋或盐田来源放线菌，它们代谢炭疽霉素的产量约为1.24～1.91mg/L，过低的产量使得对炭疽霉素的开发利用受到制约。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一株产炭疽霉素的环圈链霉菌及生产方法，产量高，具有成本低，过程简单，环境友好，易于大量生产等特点。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一株产炭疽霉素的环圈链霉菌(Streptomyces anulatus)YINM00001，所述环圈链霉菌YINM00001的保藏编号为GDMCC No.61693。

优选的，所述环圈链霉菌YINM00001的特征序列如SEQ ID No.1所示。

本发明还提供了一种利用上述环圈链霉菌YINM00001生产炭疽霉素的方法，包括以下步骤：

将所述环圈链霉菌YINM00001的种子液接种于发酵培养基上进行有氧发酵，得发酵液；所述发酵培养基包括以下质量体积百分含量的组分：2～8％可溶性淀粉、1～4％玉米浸膏、0.01～0.1％KH₂PO₄、0.01～0.05％MgSO₄、0.001～0.005％ZnSO₄·7H₂O、0.01～0.02％甲硫氨酸、0.01～0.02％维生素B12、0.1～0.5％CaCO₃和余量的水，pH值6.0～8.0；

利用乙酸乙酯萃取所述发酵液，浓缩后分离所述炭疽霉素。

优选的，所述种子液的接种体积与所述发酵培养基的体积比为5～10％。

优选的，所述有氧发酵伴随搅拌，所述有氧发酵的温度为28℃，时间为10～15d。

优选的，所述搅拌的转速为200rpm。

优选的，所述种子液的制备方法，包括：将所述环圈链霉菌YINM00001接种于活化培养基上，进行活化培养，得活化菌株；所述活化培养基包括以下质量体积百分含量的组分：0.2～0.8％酵母粉、0.2～0.8％葡萄糖、0.1～0.6％麦芽膏、0.1％生理盐水、1.5％琼脂和余量的水，所述活化培养基中还包括0.5～3mg/L复合维生素，pH值6.0～8.0；