[发明专利]一种八色荧光STR复合扩增检测试剂盒及其应用

说明书

本发明公开了一种八色荧光STR复合扩增检测试剂盒及其应用，采用八色荧光STR复合扩增检验试剂，结合国产八色荧光检测仪器平台，不仅可以有效增加单次检测位点数、提升个体识别力。同时可大幅度增加300bp范围内的可检测位点数，极大提高复合扩增试剂稳定性和耐受性。这种八色荧光DNA检验试剂将大幅度对高度腐败及含有高抑制因素检材的检验成功率，有利于疑难案件的侦破。

技术领域

本发明涉及DNA检测技术领域，具体涉及一种八色荧光STR复合扩增检测试剂盒及其应用。

背景技术

DNA检测技术已成为现代法庭科学领域最为重要的技术手段之一，是处置各类案件、重特大事故及自然灾害等重大事件中最有效的个体识别工具。基于此项技术，我国公安系统建立了各类DNA数据库(常染色体库和Y染色体库)，使得跨区域流动性犯罪和系列犯罪案件串并侦破成为常态。随着全国公安机关DNA实验室的建设和DNA技术的推广应用，DNA检验技术在各类案件侦破中的作用越来越大。

最早用于DNA检测的复合STR扩增体系之一是英国法庭科学服务部(FSS)建立的TH01、FES\FPS、vWA和F13A1四位点复合扩增系统，被称为第一代复合扩增体系，匹配概率接近万分之一。1994年，FSS发展了第二代复合扩增系统(SGM)，包括六个多态性STR基因座和一个性别基因，分别是TH01、vWA、FGA、D8S1179、D18S51、D21S11和Amelogenin(牙釉质基因)，匹配概率接近五千万分之一。1998年，在此基础上又增加了四个新STR基因座：D19S433、D2S1338、D16S539和D3S1358，匹配概率可达到百亿分之一。美国FBI为了满足办案需要建立了联合DNA索引系统(Combined DNA Index System，CODIS)，该系统由13个STR基因座组成，分别为TPOX、D3S1358、TH01、vWA、FGA、D7S820、D21S11、D18S51、D5S818、D13S317、CSF1PO、D16S539和D8S1179，无关个体的平均随机匹配概率大于万亿分之一。

2001年，美国ABI公司推出AmpFlSTR Identifiler试剂盒，首次使用五色荧光检测系统，其中四色标记PCR产物，剩余一种荧光颜色用于检测内标，以校正PCR产物片段的电泳迁移。2013年后，美国ABI公司陆续推出了包含24个位点的DNA检验试剂盒Globalfiler，包含25个位点的试剂盒VeriFiler及VeriFiler Plus。同时，美国Promega公司也推出了包含24个STR位点的PowerPlex Fusion试剂盒，该试剂盒优化了PCR反应体系和循环参数，一个28循环的扩增反应基本可在90min内完成，极大缩短了检验周期。上述试剂盒均采用六色荧光标记，在增加了检测位点的同时还提高了检验效率，缩短了检测时间。国内的一些相关单位和试剂公司，也推出了不同的STR复合扩增检测试剂盒，如公安部物证鉴定中心的Typer21(21位点)、TyperY36(36位点)等试剂盒，中德美联的EX25(25位点)、Y37(37位点)试剂盒，海尔施的PanGlobal(27位点)、PathFinder Plus(37个Y位点)试剂盒等。此外，因检测能力等原因国产试剂盒主要应用于数据库建库，疑难案件样本检测应用较少。多年发展经验表明，DNA检测技术具有可检测荧光数逐渐增加的发展趋势。