[发明专利]一种血清生产工艺中蛋白质含量快速检测的方法

说明书

本发明公开了一种血清生产工艺中蛋白质含量快速检测的方法，目前常用的蛋白质含量检测方法存在检测灵敏度高，从而需要稀释样品等多次操作，或者反应时间至少要30分钟，检测时间长的问题。本发明提供一种快速检测动物血清中蛋白质含量的方法，通过建立蛋白质浓度和动物血清的折射率的一一对应的关系，达到快速检测动物血清中蛋白质含量的方法。

技术领域

本发明涉及蛋白质检测方法技术领域，具体为一种血清生产工艺中蛋白质含量快速检测的方法。

背景技术

成牛血清的总蛋白含量和免疫球蛋白含量都高于胎牛血清，尤其是其中的免疫球蛋白成分，会对成牛血清应用于免疫实验中的封闭实验或者细胞培养产生不良的影响。目前发现使用直径为50nm的陶瓷膜过滤可以有效的降低成牛血清中的免疫球蛋白，然而由于不同批次、不同原料供应商提供的成牛血清原料的总蛋白含量和免疫球蛋白的含量有较大的差异，需要在过滤时实时监控血清浸出液中的总蛋白的浓度，在最佳的时间终止过滤，获得蛋白质含量符合生产要求的血清浸出液的同时获得最大的产能。

目前的蛋白质含量测定法主要有凯氏定氮法、福林酚法(Lowry法)、双缩脲法、2,2'-联喹啉-4，4’-二羧酸法(BCA法)、考马斯亮蓝法(Bradford法)、紫外－可见分光光度法。这几种检测方法存在检测灵敏度高，从而需要稀释样品等多次操作，或者反应时间至少要30分钟，检测时间长的问题，不能实现实时在线的监控使用陶瓷膜设备过滤成牛血清时血清浸出液中蛋白质等大分子物质含量的目的。

因而需要寻找一种检测范围宽，检测时间短的检测方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种血清生产工艺中蛋白质含量快速检测的方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

为使制备的牛血清能够用于细胞培养或免疫实验中，在成牛血清工业生产中，对牛血清中蛋白质的含量需要实时监控，并在过滤时快速精准的停在最佳浓度处，从而获得蛋白质含量符合生产要求的血清浸出液的同时获得最大的产能；在该过程中，如何快度精准的确定过滤终点是所要解决的技术问题。

为了解决上述技术问题，本发明提供如下技术方案：

一种测定动物血清中蛋白质含量的方法，步骤包括，

a、建立动物血清中蛋白质含量和动物血清折射率的一一对应关系；

b、根据待测动物血清的折射率确定动物血清中蛋白质的含量。

进一步的，步骤a中所述的一一对应关系为：

Y＝1.0535x-5.4659；

y＝0.0002x+1.333；

其中Y为动物血清中蛋白质含量，单位为mg/ml；

y为动物血清折射率；

x为折射率回算蛋白浓度。

进一步的，所述动物血清经过陶瓷膜过滤。

进一步的，所述动物为牛。

与现有技术相比，本发明所达到的有益效果是：

1、检测时间短，折射计检测折射率仅需3秒，在结合一一对应关系，可以快速确定蛋白质的含量，提高了检测速度，节省了成本。

2、实现了实时监控血清浸出液中蛋白质含量，在最佳的时间终止过滤，获得蛋白质含量符合生产要求的血清浸出液的同时获得最大的产能。

3、本发明克服了蛋白检测传统方法的样品需多次稀释和检测时间过长的问题，解决了长期未解决的技术难题，具有意想不到的技术效果。