[发明专利]基于智能控制的NTP/dNTP层析分离方法及系统

权利要求书

1.一种基于智能控制的NTP/ dNTP层析分离方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）上样，在低温层析柜中，NTP/ dNTP反应清液依次通过阳离子交换树脂柱和阴离子交换树脂柱，NTP/ dNTP被吸附至所述阴离子交换树脂柱中；

（2）水洗，上样结束后，采用5～10倍树脂柱体积的去离子水或纯化水对阳离子交换树脂柱和阴离子交换树脂柱进行水洗；

（3）梯度洗脱，断开所述阳离子交换树脂柱，对所述阴离子交换树脂柱进行梯度洗脱，并采用HPLC检测器对所述阴离子交换树脂柱的流出液进行定时检测，并收集浓度≥5g/L的NTP/ dNTP溶液，

所述上样过程中，采用设于所述低温层析柜外部的核酸蛋白检测仪分别对所述阳离子交换树脂柱和阴离子交换树脂柱的流出液进行实时在线检测，当所述阴离子交换树脂柱的流出液A260≥1时，上样结束，

所述步骤（2）中，采用设于所述低温层析柜外部的核酸蛋白检测仪对所述阴离子交换树脂柱的流出液进行实时在线检测，当A260＜1时，排废，反之则收集流出液，

所述NTP/ dNTP溶液的收集过程如下：采用HPLC检测器对所述阴离子交换树脂柱的流出液进行定时检测过程中，当所述阴离子交换树脂柱的流出液中检测出NTP/ dNTP，且NTP/dNTP的浓度≥5g/L时，则开始收集NTP/ dNTP溶液；当阴离子交换树脂柱的流出液中NTP/dNTP的浓度＜5g/L时，则停止收集，

所述核酸蛋白检测仪和所述HPLC检测器对所述阳离子交换树脂柱、阴离子交换树脂柱的流出液进行检测，并将检测信息传递给控制系统，

控制系统接收所述核酸蛋白检测仪和所述HPLC检测器的检测信息，根据所述检测信息生成水洗指令、洗脱指令和收集指令，并输出信号至上样机构、水洗机构、洗脱机构、柱层析单元、收集器和检测机构。

2.根据权利要求1所述的基于智能控制的NTP/ dNTP层析分离方法，其特征在于，所述步骤（1）中：

所述低温层析柜内的温度为4～8℃；和/或

所述阳离子交换树脂柱为再生的Na型阳离子交换树脂柱；所述阴离子交换树脂柱再生的Cl型阴离子交换树脂柱。

3.根据权利要求1所述的基于智能控制的NTP/ dNTP层析分离方法，其特征在于，所述步骤（3）中：

所述梯度洗脱过程中，采用质量百分浓度为0～5%的NaCl溶液对所述阴离子交换树脂柱进行洗脱。

4.根据权利要求1所述的基于智能控制的NTP/ dNTP层析分离方法，其特征在于，所述步骤（3）中，洗脱后收集的NTP/ dNTP溶液经结晶、过滤、真空干燥得到纯度≥98%的NTP/dNTP产品。

5.一种权利要求1-4任一项所述的基于智能控制的NTP/ dNTP层析分离方法中所使用的智能层析分离系统，其特征在于，所述智能层析分离系统包括低温层析柜、检测机构以及控制系统；

所述低温层析柜内设有上样机构、水洗机构、洗脱机构、柱层析单元和收集器；所述柱层析单元包括串联的阳离子交换树脂柱和阴离子交换树脂柱，所述阳离子交换树脂柱和阴离子交换树脂柱之间设有单向阀；所述上样机构、水洗机构、洗脱机构分别与所述阳离子交换树脂柱、阴离子交换树脂柱的进液口连通；所述收集器与所述阴离子交换树脂柱的出液口连通；

所述检测机构对所述阳离子交换树脂柱、阴离子交换树脂柱的流出液进行检测，并将检测信息传递给所述控制系统；

所述控制系统接收所述检测机构的检测信息，根据所述检测信息生成水洗指令、洗脱指令和收集指令，并输出信号至所述上样机构、水洗机构、洗脱机构、柱层析单元、收集器和检测机构。