[发明专利]一种除虫菊大根香叶烯D合成酶TcGDS1及其编码基因与应用有效
| 申请号： | 202111115211.6 | 申请日： | 2021-09-23 |
| 公开（公告）号： | CN113846083B | 公开（公告）日： | 2023-07-21 |
| 发明（设计）人： | 王彩云;李进进;李茂元;胡昊 | 申请（专利权）人： | 华中农业大学 |
| 主分类号： | C12N9/88 | 分类号： | C12N9/88;C12N15/60;C12N15/70;C12N1/21;C12P5/00;C12R1/19 |
| 代理公司： | 武汉天领众智专利代理事务所(普通合伙) 42300 | 代理人： | 王能德 |
| 地址： | 430000 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 除虫菊 大根香叶烯 合成 tcgds1 及其 编码 基因 应用 | ||
1.一种除虫菊大根香叶烯D合成酶TcGDS1，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
2.一种编码权利要求1所述的除虫菊大根香叶烯D合成酶TcGDS1的基因，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
3.一种重组表达载体，其特征在于，包含权利要求2所述的除虫菊大根香叶烯D合成酶TcGDS1的编码基因。
4.一种宿主细胞，其特征在于，由权利要求3所述的重组表达载体转化获得。
5.如权利要求4所述的宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞选自酵母、藻类、霉菌和细菌中的一种。
6.如权利要求5所述的宿主细胞，其特征在于，所述细菌选自大肠杆菌Top10或大肠杆菌BL21(DE3)中的一种。
7.一种制备权利要求1所述的除虫菊大根香叶烯D合成酶TcGDS1的方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1、利用PCR技术扩增如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列；
S2、将SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列克隆至载体质粒中，构建含有除虫菊大根香叶烯D合成酶TcGDS1基因的表达载体；
S3、将所述表达载体转入宿主细胞中获得重组菌体，所述重组菌体依次经过扩大培养、诱导表达、收集菌体、破碎菌体和蛋白纯化过程得到除虫菊大根香叶烯D合成酶TcGDS1。
8.如权利要求7所述的制备除虫菊大根香叶烯D合成酶TcGDS1的方法，其特征在于，步骤S2中，所述表达载体为pET6xHN-C。
9.如权利要求7所述的制备除虫菊大根香叶烯D合成酶TcGDS1的方法，其特征在于，步骤S3中，所述蛋白纯化过程是用Ni-NTA亲和层析色谱柱进行纯化。
10.权利要求1所述的除虫菊大根香叶烯D合成酶TcGDS1在制备大根香叶烯D中的应用。
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