[发明专利]检测急性B淋巴细胞白血病微小残留的抗体组合物及方法

说明书

本发明公开了一种检测急性B淋巴细胞白血病微小残留的抗体组合物及方法，所述抗体组合物包括抗CD19抗体、抗CD10抗体、抗CD34抗体和抗CD22抗体。本发明可以实现仅需一管完成17个指标的检测，样本量需求少，骨架抗体不需要重复使用，试剂成本低，设计的17个检测指标涵盖各种异常细胞的表达模式，提升了白血病微小残留细胞的检出率，不仅可用于治疗后微小残留病灶的检测，还可用于初诊患者肿瘤性标记的筛选。

技术领域

本发明属于生物医学检测技术领域，更具体地说，本发明涉及一种检测急性B淋巴细胞白血病微小残留的抗体组合物、试剂盒及检测方法。

背景技术

急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia，ALL)是早期分化阶段淋巴细胞恶性克隆性增殖性疾病，同时它也是一组高度异质性疾病，其中，急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)发病率约占急性淋巴细胞白血病的85％，以骨髓与外周血中原始和幼稚髓性细胞异常增生为主要特征，临床表现为贫血、出血、感染和发热、脏器浸润、代谢异常等，多数病例病情急重，预后凶险，如不及时治疗常可危及生命。

目前，通过联合化疗，白血病完全缓解率大大提高，但白血病复发是当前白血病治疗的主要问题，复发的根源主要来自体内残留的白血病细胞。通常，将这种白血病经治疗缓解后体内仍残留少量白血病细胞的状态定义为微小残留病(minimal residual disease，MRD)。

临床上需要根据MRD水平的高低，调整治疗方案，调节用药量，以达到治愈的目的。因此，能否准确测定MRD具有重要的临床价值。目前可用于急性淋巴细胞白血病微小残留检测的有细胞形态学、染色体核型分析、分子生物学相关基因检测、多参数流式细胞分析等几种方法。

细胞形态学分析其灵敏度较低，且治疗后残留的肿瘤细胞可能较少，形态学有一定的局限；染色体核型分析实验周期较长；分子生物学方法虽然灵敏度较高，但对于核型正常的病例，则无法使用。基于白血病相关免疫表型的多参数流式细胞术(FCM)检测微小残留，具有快速简便的特点，是目前公认的检测微小残留的有效方法。

使用多参数流式细胞术检测残存白血病细胞采用的分析方法主要为监测白血病相关免疫表型(LAIP)或“不同于正常的表达模式”(DFN)，LAIP方法需要在初诊免疫分型时进行指标的筛选，否则容易漏诊，而DFN方法对分析人员的经验和专业知识水平要求较高。进行多参数流式细胞分析可使用传统流式细胞仪进行检测，但受到检测通道影响，目前较多使用的是6～10色的检测方案，每个样本需要进行多个不同的检测，不仅骨架抗体需要重复检测，且所需要的样本量较多，灵敏度不高。

使用多参数流式细胞术检测残存白血病细胞的关键点是要鉴别正常分化前体细胞与异常白血病细胞，仅利用单一的一种白细胞分化抗原作为检测微小残留病的特异性的免疫标志较为困难，因此，目前多采用在急性淋巴细胞白血病细胞及正常骨髓细胞差异表达的抗原的组合，进行细胞的分型分类。

现有研究中MRD检测一般使用胞膜泛B细胞标志CD19辅以SSC或者CD45(CD19/SSC或者CD45/CD19双参数)来设门找到目的B细胞，但对于CD19-CAR-T细胞输注治疗后的患者，治疗后部分正常或异常的B细胞表面CD19抗原已呈现表达丢失或减弱，发生免疫逃逸，因此可能产生因为CD19表达减弱或者丢失而造成的漏诊。目前仍缺乏具有高度敏感性和特异性的免疫标志物进行微小残留水平的高效准确的检测。

根据以上所述，临床上需要一种灵敏度高、准确性高、检出率高、简便快速的检测技术，以及时监测急性B淋巴细胞白血病的微小残留病灶。

发明内容

基于此，本发明的目的之一是提供一种检测急性B淋巴细胞白血病微小残留的抗体组合物，该抗体组合物设计的检测指标涵盖急性B淋巴细胞白血病各种异常细胞的表达模式，可以克服容易漏诊的缺陷。

实现上述发明目的的具体技术方案如下：