[发明专利]一种富集花生植株中类黄酮、萜类和/或芪类化合物的方法

权利要求书

1.一种富集花生荚壳中类黄酮化合物的方法，其特征在于，步骤如下：

(1) 将花生荚壳清洗晾干后超微粉碎并过100目筛；

(2) 按固液比1:20 g/mL向经超微粉碎的花生荚壳粉中加水，于30℃、180 r/min条件下震荡浸提60 min，离心抽滤后保留沉淀，重复该操作3次；

(3) 向步骤(2)所得沉淀中按固液比1:20 g/mL加入10%乙醇水溶液，于30℃、180 r/min条件下震荡浸提60 min，离心抽滤后保留沉淀，重复该操作3次；

(4) 向步骤(3)所得沉淀中按固液比1:20 g/mL加入40%乙醇水溶液，于30℃、180 r/min条件下震荡浸提60 min，离心抽滤后保留上清液，重复该操作4次；

(5) 将步骤(4)所得上清液经旋转蒸发浓缩至原体积的15%后冷冻干燥得粉末；

(6) 按照固液比1: 200 g/mL向步骤(5)所得粉末中加入40%乙醇水溶液复溶，离心抽滤后保留上清液；

(7) 将步骤(6)所得上清液经旋转蒸发浓缩至原体积的15%后冷冻干燥得含类黄酮化合物的花生壳活性成分富集物粉末；

(8) 按照径高比1:5，其中，直径30 cm，高150 cm，对D101型大孔树脂纯化柱进行装柱，采用上样液以2 BV/h流速平衡柱子，待pH试纸指示流出液pH值为5.0时，平衡完毕；将步骤(7)所得含类黄酮化合物的花生壳活性成分富集物粉末按照固液比1:50 g/mL溶于上样液中制成样品溶液，以0.75 BV/h的流速上样，经D101型大孔树脂纯化柱吸附2个柱体积后，再采用上样液以0.75 BV/h流速洗脱1.5个柱体积，再采用洗脱液以1.5 BV/h的流速进行洗脱，待0.5个柱体积后收集流出液，至1.5个柱体积后停止收集，洗脱液经旋转蒸发浓缩至原体积的15%后冷冻干燥得花生壳类黄酮富集物粉末；

(9) 将步骤(7)和步骤(8)所得花生壳活性成分富集物粉末和花生壳类黄酮富集物粉末，分别包装后得成品；

所述步骤(8)中上样液为经2 mol/L醋酸调节的pH值为5.0的40%乙醇水溶液；洗脱液为经4 mol/L的NaOH调节的pH 10.0的70%乙醇水溶液。

2.一种富集花生根中芪类化合物的方法，其特征在于，步骤如下：

(1) 将花生根清洗晾干后超微粉碎并过100目筛；

(2) 按固液比1:20 g/mL向经超微粉碎的花生根粉中加水，于30℃、180 r/min条件下震荡浸提40 min，离心抽滤后保留沉淀，重复该操作4次；

(3) 向步骤(2)所得沉淀中按固液比1:20 g/mL加入20%乙醇水溶液，于30℃、180 r/min条件下震荡浸提40 min，离心抽滤后保留沉淀，重复该操作4次；

(4) 向步骤(3)所得沉淀中按固液比1:20 g/mL加入60%乙醇水溶液，于30℃、180 r/min条件下震荡浸提60 min，离心抽滤后保留上清液，重复该操作5次；

(5) 将步骤(4)所得上清液经旋转蒸发浓缩至原体积的15%后冷冻干燥得粉末；

(6) 按照固液比1: 200 g/mL向步骤(5)所得粉末中加入40%乙醇水溶液复溶，离心抽滤后保留上清液；

(7) 将步骤(6)所得上清液经旋转蒸发浓缩至原体积的15%后冷冻干燥得含芪类化合物的花生根活性成分富集物粉末；

(8) 按照径高比1:5，其中，直径30 cm，高150 cm，对DM301型大孔树脂纯化柱进行装柱，采用上样液以2 BV/h流速平衡柱子，待pH试纸指示流出液pH值为4.5时，平衡完毕；将步骤(7)所得含芪类化合物的花生根活性成分富集物粉末按照固液比1:50 g/mL溶于上样液中制成样品溶液，以0.75 BV/h的流速上样，经DM301型大孔树脂纯化柱吸附2个柱体积后，再采用上样液以0.75 BV/h流速洗脱1.5个柱体积，再采用洗脱液以1.5 BV/h的流速进行洗脱，待0.5个柱体积后收集流出液，至1.5个柱体积后停止收集，洗脱液经旋转蒸发浓缩至原体积的15%后冷冻干燥得花生根芪类富集物粉末；

(9) 将步骤(7)和步骤(8)所得花生根活性成分富集物粉末和花生根芪类富集物粉末，分别包装后得成品；

所述步骤(8)中上样液为经2 mol/L醋酸调节的pH值为4.5的40%乙醇水溶液；洗脱液为经4 mol/L的NaOH调节的pH 7.5的85%乙醇水溶液。

3.一种富集花生茎叶中类黄酮与萜类化合物的方法，其特征在于，步骤如下：

(1) 将花生茎叶清洗晾干后粉碎并过30目筛；

(2) 按固液比1:20 g/mL向粉碎后花生茎叶粉中加入30%乙醇水溶液，于30℃、180 r/min条件下震荡浸提30 min，离心抽滤后保留上清液与沉淀，重复该操作5次，获得浸提上清液A；

(3) 将步骤(2)所得上清液A经旋转蒸发浓缩至原体积的15%后冷冻干燥得粉末A；

(4) 向步骤(2)所得沉淀中按固液比1:20 g/mL加入50%乙醇水溶液，于30℃、180 r/min条件下震荡浸提30 min，离心抽滤后保留上清液，重复该操作5次，获得浸提上清液B；

(5) 将步骤(4)所得上清液B经旋转蒸发浓缩至原体积的15%后冷冻干燥得粉末B；

(6) 按照固液比1: 150 g/mL向步骤(3)和(5)所得粉末A、B中分别加入30%和50%乙醇水溶液复溶，离心抽滤后保留上清液A和B；

(7) 将步骤(6)所得上清液A和B分别经旋转蒸发浓缩至原体积的15%后冷冻干燥得含类黄酮和萜类化合物的花生茎叶活性成分提取物粉末；

(8) 按照径高比1:5，其中直径30 cm，高150 cm，对D101型大孔树脂纯化柱进行装柱，采用上样液以2 BV/h流速平衡柱子，待pH试纸指示流出液pH值为5.0时，平衡完毕；将步骤(7)所得含类黄酮化合物的花生茎叶活性成分提取物粉末按照固液比1:50 g/mL溶于上样液中制成样品溶液，以0.75 BV/h的流速上样，经D101型大孔树脂纯化柱吸附2个柱体积后，再采用上样液以0.75 BV/h流速洗脱1.5个柱体积，再采用洗脱液以1.5 BV/h的流速进行洗脱，待0.5个柱体积后收集流出液，至1.5个柱体积后停止收集，洗脱液经旋转蒸发浓缩至原体积的15%后冷冻干燥得花生茎叶类黄酮富集物粉末；

(9) 按照径高比1:5，其中，直径30 cm，高150 cm，对DM301型大孔树脂纯化柱进行装柱，采用上样液以2 BV/h流速平衡柱子，待pH试纸指示流出液pH值为9.0时，平衡完毕；将步骤(7)所得含萜类化合物的花生茎叶活性成分提取物粉末按照固液比1:50 g/mL溶于上样液中制成样品溶液，以0.75 BV/h的流速上样，经DM301型大孔树脂纯化柱吸附2个柱体积后，再采用上样液以0.75 BV/h流速洗脱1.5个柱体积，再采用洗脱液以1.5 BV/h的流速进行洗脱，待0.5个柱体积后收集流出液，至1.5个柱体积后停止收集，洗脱液经旋转蒸发浓缩至原体积的15%后冷冻干燥得花生茎叶萜类富集物粉末；

(10) 将步骤(7)、步骤(8)和步骤(9)所得花生茎叶类黄酮提取物粉末、萜类提取物粉末和花生茎叶类黄酮富集物粉末、萜类富集物粉末，分别包装后得成品；

所述步骤(8)中上样液为经2 mol/L醋酸调节的pH值为5.0的30%乙醇水溶液；洗脱液为经4 mol/L的NaOH调节的pH 10.0的70%乙醇水溶液；

所述步骤(9)中上样液为经2 mol/L的NaOH调节的pH值为9.0的50%乙醇水溶液；洗脱液为经2 mol/L的醋酸调节的pH 6.0的85%乙醇水溶液。