[发明专利]一种递送抗肿瘤药物的羧甲基壳聚糖纳米凝胶

权利要求书

1.一种递送抗肿瘤药物的羧甲基壳聚糖纳米凝胶的制备，其特征在于所述纳米凝胶的制备包括以下步骤：

1)甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA)修饰的CMCS制备

将羧甲基壳聚糖CMCS加入去离子水中，搅拌至完全溶解后，过0.45μM微孔滤膜进行简单纯化，得到CMCS溶液；在CMCS溶液中分别滴加GMA，磁力搅拌48h后用1.0M的盐酸溶液将反应液pH调节为7，装入透析袋(MWCO:8～14KDa)透析24h除去未反应的杂质，得到甲基丙烯酸缩水甘油酯修饰的羧甲基壳聚糖GCMCS；

2)二硫键交联的羧甲基壳聚糖纳米凝胶制备

取步骤1)中反应得到的30mL甲基丙烯酸缩水甘油酯修饰的羧甲基壳聚糖GCMCS透析保留液，加热至60℃，在N₂保护下加入30mgN,N'双(丙烯酰)胱胺BAC和6mg过硫酸钾KPS持续反应3h，待冷却后加入透析袋(MWCO:8～14KDa)透析5天除去小分子杂质，产物冻干后得到二硫键交联的羧甲基壳聚糖纳米凝胶GCMCS-SS；

3)叶酸修饰的羧甲基壳聚糖纳米凝胶制备

叶酸在二甲基亚砜(DMSO)中完全超声溶解后，加入N-羟基琥珀酰亚胺NHS，水溶性缩合剂EDC·HCl和三乙胺搅拌30min后，再加入GCMCS-SS水溶液(10mL，20mg/mL)在常温下反应24h后用氢氧化钠调节反应液pH至9，将反应液装入透析袋在磷酸盐缓冲液PBS(pH＝7.4)中透析3天，再在去离子水中透析2天；透析保留液经冷冻干燥得到叶酸修饰的羧甲基壳聚糖纳米凝胶(GCMCS-FA)；

4)装载阿霉素的叶酸修饰羧甲基壳聚糖纳米载药凝胶制备

将阿霉素加入GCMCS-FA水溶液(1mg/mL)中，搅拌4h后将溶液转移至透析袋(MWCO:8～14KDa)中透析24h，透析保留液经冷冻干燥得到负载阿霉素的叶酸修饰羧甲基壳聚糖纳米载药凝胶(GCMCS-FA-DOX)。

2.根据权利要求1所述一种递送抗肿瘤药物的羧甲基壳聚糖纳米凝胶的制备，其特征在于所述步骤1)中羧甲基壳聚糖与去离子水的重量体积g/ml比为1:200。

3.根据权利要求1所述一种递送抗肿瘤药物的羧甲基壳聚糖纳米凝胶的制备，其特征在于所述步骤1)中羧甲基壳聚糖与甲基丙烯酸缩水甘油酯的重量体积比为2:3。

4.根据权利要求1所述一种递送抗肿瘤药物的羧甲基壳聚糖纳米凝胶的制备，其特征在于所述步骤2)中BAC与甲基丙烯酸缩水甘油酯修饰的羧甲基壳聚糖GCMCS的重量体积比mg/ml为1:1。

5.根据权利要求1所述一种递送抗肿瘤药物的羧甲基壳聚糖纳米凝胶的制备，其特征在于所述步骤2)中BAC与KPS的重量比为1:1。

6.根据权利要求1所述一种递送抗肿瘤药物的羧甲基壳聚糖纳米凝胶的制备，其特征在于所述步骤3)中叶酸与二甲基亚砜的重量体积比mg/mL为50:3。

7.根据权利要求1所述一种递送抗肿瘤药物的羧甲基壳聚糖纳米凝胶的制备，其特征在于所述步骤3)中叶酸:N-羟基琥珀酰亚胺:水溶性缩合剂EDC·HCl为25:7:20；所述水溶性缩合剂EDC·HCl和三乙胺的重量体积比g/mL为2:15。

8.根据权利要求1所述一种递送抗肿瘤药物的羧甲基壳聚糖纳米凝胶的制备，其特征在于所述步骤3)中叶酸与GCMCS-SS溶液的重量体积比g/mL为1:40。

9.根据权利要求1所述一种递送抗肿瘤药物的羧甲基壳聚糖纳米凝胶的制备，其特征在于所述步骤4)中阿霉素与GCMCS-FA溶液的重量体积比mg/mL为1:4。

10.如权利要求1-9中任意一项所述方法制备得到的递送抗肿瘤药物的羧甲基壳聚糖纳米凝胶。