[发明专利]裂解性大肠杆菌噬菌体制剂及其制备和应用

说明书

本发明公开了一种裂解性大肠杆菌噬菌体制剂及其制备和应用，所述制剂包括噬菌体PNJ1902、PSD2001和PSD2002；其中，噬菌体PNJ1902的保藏编号为GDMCC NO：61890‑B1，噬菌体PSD2001的保藏编号为GDMCC NO：61891‑B1，噬菌体PSD2002的保藏编号为GDMCC NO：61892‑B1。噬菌体制剂的宿主菌为大肠杆菌O157：H7(ATCC:43895)，其对大肠杆菌ATCC:43895不同年龄的生物被膜具有有效的清除能力，在小鼠肠道中的应用实例也证实，当其用做于体内抑菌剂时具备良好的效果。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及裂解性大肠杆菌噬菌体制剂及其制备和应用。

背景技术

大肠杆菌O157：H7(ATCC:43895)(购买于Testobio，产品编号TS205491)作为一种人畜共患病原菌，可引起人类出血性结肠炎(HC)，有时并发溶血性尿毒综合征(HUS)，严重者并发肾功能衰竭，死亡率较高。大肠杆菌ATCC:43895在猪、牛粪、猪肉和牛肉中的分离率非常高。其主要通过食物传播，对公众健康构成威胁。同时，研究发现，大肠杆菌ATCC:43895自1997年后在世界各地出现耐药菌株。因此，迫切需要新的抗生素替代品来预防和治疗大肠杆菌ATCC:43895疾病。

作为一种有效杀灭细菌的病毒，噬菌体在治疗细菌感染相关疾病方面的应用价值得到了重新评估。噬菌体作为一种天然抗菌药物，其固有毒性低，可自我复制，与宿主高度特异性结合，可与宿主共同进化，可有效治疗耐药菌引起的感染。与抗生素治疗大肠杆菌感染的小鼠模型相比，噬菌体疗法不仅可以降低体内大肠杆菌的含量，保证小鼠的正常生长，而且不会影响肠道菌群。这为今后治疗耐药菌引起的胃肠道感染提供了新思路。但是，目前来说，细菌对单个噬菌体容易产生抗性使单个噬菌体在应用上受到了很大的限制，即现有单个噬菌体对宿主菌刚开始裂解效果良好，但很快就会有抗性细菌产生，导致单个噬菌体失去对抗性细菌的裂解作用，不能满足生产需要。

发明内容

本发明目的在于提供裂解性大肠杆菌噬菌体制剂及其制备和应用，噬菌体制剂的宿主菌为大肠杆菌O157：H7(ATCC:43895)，其对大肠杆菌ATCC:43895不同年龄的生物被膜具有有效的清除能力，在小鼠肠道中的应用实例也证实，当其用做于体内抑菌剂时具备良好的效果。

本发明目的之一在于提供一种裂解性大肠杆菌噬菌体制剂，所述制剂包括噬菌体PNJ1902、PSD2001和PSD2002；其中，噬菌体PNJ1902的保藏编号为GDMCC NO：61890-B1，噬菌体PSD2001的保藏编号为GDMCC NO：61891-B1，噬菌体PSD2002的保藏编号为GDMCC NO：61892-B1。

在一些实施例中，本申请所述的噬菌体制剂中噬菌体PNJ1902、噬菌体PSD2001和噬菌体PSD2002的效价比例为(1～3)：(1～3)：(1～3)，优选的，噬菌体PNJ1902、噬菌体PSD2001和噬菌体PSD2002的效价比例为1：1：1。

申请人从江苏省南京市鸡场分离到噬菌体PNJ1902，从山东省菏泽市鸭场中筛选出为噬菌体PSD2001和噬菌体PSD2002，已于2021年8月26日保藏于广东省微生物菌种保藏中心(地址：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼)，所述的PNJ1902的命名为：大肠杆菌O157：H7噬菌体PNJ1902，分类命名为Escherichia coli phage，其保藏编号为GDMCC NO：61890-B1；所述的PSD2001的命名为：大肠杆菌O157：H7噬菌体PSD2001，分类命名为Escherichia coli phage，其保藏编号为：GDMCC NO：61891-B1；所述的PSD2002的命名为：大肠杆菌O157：H7噬菌体PSD2002，分类命名为Escherichia coli phage，其保藏编号为：GDMCC NO：61892-B1。