[发明专利]乌蛇止痒丸的指纹图谱构建和检测方法

权利要求书

1.一种乌蛇止痒丸的指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述构建方法包括如下步骤：

取对照品和乌蛇止痒丸样品，分别制备对照品溶液和供试品溶液；采用高效液相色谱法对所述对照品溶液和所述供试品溶液进行检测，获得相应的检测图谱和对照图谱；将所述检测图谱导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统进行分析，生成标准指纹图谱，参照所述对照图谱对所述标准指纹图谱的色谱峰进行指认，获得乌蛇止痒丸的指纹图谱；

所述对照品包含人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rb3、人参皂苷Rc、人参皂苷F1、人参皂苷Rd、人参皂苷F2、人参皂苷Rg2、人参皂苷Rg3、5-O-甲基维斯阿米醇苷、升麻素苷、升麻素、亥茅酚苷、蛇床子素、欧前胡素、花椒毒酚、花椒毒素、佛手柑内酯、盐酸小檗碱、盐酸巴马汀、盐酸黄柏碱、盐酸药根碱、丹皮酚、芍药苷、丹皮酚原苷、苦参碱、氧化苦参碱、槐果碱、氧化槐果碱、木兰花碱、掌叶防已碱、柠檬苦素、黄柏酮、胆红素和二氢欧山芹醇当归酸酯中的至少一种；

检测所采用条件包括：固定相采用C8色谱柱或者C18色谱柱，流动相A为水或者甲酸水溶液，流动相B为乙腈，采用梯度洗脱。

2.根据权利要求1所述的乌蛇止痒丸的指纹图谱的构建方法，其特征在于，梯度洗脱的程序包括：

0min～5min，所述流动相B的体积百分比为5％；

5min～35min，所述流动相B的体积百分比由5％升高至20％；

35min～40min，所述流动相B的体积百分比为20％；

40min～48min，所述流动相B的体积百分比由20％升高至23％；

48min～60min，所述流动相B的体积百分比由23％升高至35％；

60min～90min，所述流动相B的体积百分比由35％升高至55％；

90min～105min，所述流动相B的体积百分比由55％升高至95％；

105min～115min，所述流动相B的体积百分比为95％；

或/和，所述固定相中填料的粒径为1.5μm～3μm；

优选地，检测所采用条件还包括：波长为230nm～300nm；或/和，流速为0.1mL/min～0.6mL/min；或/和，柱温为20℃～50℃；或/和，进样量为1μL～6μL。

3.根据权利要求1或者2所述的乌蛇止痒丸的指纹图谱的构建方法，其特征在于，制备所述对照品溶液采用的溶解溶剂含有甲醇；

或/和，制备所述供试品溶液的步骤包括：用提取溶剂对所述乌蛇止痒丸样品进行提取，收集提取液；

优选地，所述提取溶剂含甲醇的体积百分比为10％～100％；或/和，提取的方式采用超声提取；或/和，收集所述提取液的方式采用离心或者过滤。

4.根据权利要求1或者2所述的乌蛇止痒丸的指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述特征图谱包含34个特征峰，其中，7号峰为升麻素苷，9号峰为升麻素、14号峰为5-O-甲基维斯阿米醇苷，15号峰为药根碱，20号峰为小檗碱，21号峰为巴马汀，22号峰为丹皮酚，23号峰为佛手柑内酯，25号峰为花椒毒素，30号峰为花椒毒酚，32号峰为蛇床子素。

5.一种乌蛇止痒丸的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括如下步骤：

取待测样品，制备供试品溶液，采用高效液相色谱法对所述供试品溶液进行检测，并将所得检测图谱与权利要求1至4任一项构建获得的指纹图谱进行比较；

检测所采用条件包括：固定相采用C8色谱柱或者C18色谱柱，流动相A为水或者甲酸水溶液，流动相B为乙腈，采用梯度洗脱。