[发明专利]用于异相体系免疫反应的即用型封闭液及制备和应用

说明书

本发明涉及生化免疫检测技术领域，具体公开了一种用于异相体系免疫反应的即用型封闭液及制备和应用。用于异相体系免疫反应的即用型封闭液包括如下质量百分比的成分：糖类物质为5％‑10％，PVP为0.1％‑1.0％，PVA为0.3％‑0.7％，惰性蛋白为0.3％‑1％，山梨醇为0.5％‑1％，防腐剂为0.05％‑0.15％，其余为辅助原料，所述辅助原料为缓冲液，所述缓冲液的浓度为10mM/L‑50mM/L，封闭液具有提高异相反应的检测结果的准确度以及精简工艺开发流程的优点。

技术领域

本发明涉及生化免疫检测技术领域，更具体地说，它涉及一种用于异相体系免疫反应的即用型封闭液及制备和应用。

背景技术

POCT是体外诊断行业的一个细分领域，由于其相关产品设计简单、技术创新、检测便捷、能够快速取得诊断结果，所以该行业发展迅速。据有关报告，从免疫层析技术开始，POCT产品在医院、诊所和患者加重开始普及，并且技术更迭，逐渐向精密的微流控技术发展。微流控芯片相对于层析技术，能更少的消耗样品，结果重复性能好，检测范围更广，结果更佳稳定。

但是由于微流控芯片材料、结构和检测原理等方面的原因，一致存在一些较难攻克的技术难题。基于微流控芯片检测平台的生化免疫检测项目以及分子检测项目，多是固液相反应，即异相反应。相对于均相反应，异相反应的接触面积小、反应效率低、干扰因素多，很容易得到假阳性或者假阴性结果。

所以在设计产品时，需要找到增大接触面积、提高反应效率、减少干扰、提高检测结果准确性的方法。增大接触面积需要从芯片本身结构、以及产品原料上着手；提高反应效率和减少干扰、提高检测准确度，方法很多，但是优化时间长，可能还要从原材料、反应体系多方面去一一优化，耗费人力、物力、财力。

所以若能够设计开发一种试剂，直接作用于芯片的靶点上，得到提高反应效率和减少干扰、提高检测准确度的效果，即精简了工艺开发流程，也节约了开发时间，本发明就是一种能够用于异相体系免疫反应的，能够提高反应效率和减少干扰、提高检测准确度的，即用型封闭试剂。当前市面上的多款封闭剂，一般是需要加在生物质原材料溶液中，或者添加在样品垫中，产品开发过程需要多种优化途径，影响生物质原材料活性、影响整个体系稳定、影响液相的流动性质。

发明内容

为了提高异相反应的检测结果的准确度以及精简工艺开发流程，本发明提供一种用于异相体系免疫反应的即用型封闭液。

一种用于异相体系免疫反应的即用型封闭液，包括如下质量百分比的成分：糖类物质为5％-10％，PVP为0.1％-1.0％，PVA为0.3％-0.7％，惰性蛋白为0.3％-1％，山梨醇为0.5％-1％，防腐剂为0.05％-0.15％，其余为辅助原料，所述辅助原料为缓冲液，所述缓冲液的浓度为10mM/L-50mM/L。

通过采用上述技术方案，糖类物质能够增强反应信号，保护抗体作用；惰性蛋白主要降低非特异性吸附，糖类物质和惰性蛋白一起具有成膜作用；PVP大分子在反应体系中起到分散作用和助溶作用，PVA的作用为调节流动性，流动性得到控制后，能够有效阻止位点上形成气泡；山梨醇起到保湿作用，能够保护抗体，起到增强稳定性；防腐剂主要起抑菌防腐的作用，缓冲液的作为普通基质，在大量样本充满固相载体时，对整个体系起到pH缓冲，保持反应环境的稳定性。

优选的，所述糖类物质为海藻糖、蔗糖、葡萄糖的任意一种。

通过采用上述技术方案，可选择其中一种进行反应作用，其中海藻糖增强反应信号的效果最佳。

优选的，所述PVP可由羟乙基纤维素或者PAM替代。

通过采用上述技术方案，羟乙基纤维素或者PAM可替代PVP的效果，从而达到分散作用和助溶作用。

优选的，所述惰性蛋白为BSA、酪蛋白的任意一种。

通过采用上述技术方案，可选择其中一种惰性蛋白进行作用，其中BSA降低非特异性吸附的作用最佳。