[发明专利]一种利用低共熔溶剂提取酵母β-葡聚糖的方法

说明书

本发明公开了一种利用低共熔溶剂提取酵母β‑葡聚糖的方法。本发明的提取方法包括：诱导产朊假丝酵母细胞自溶，洗涤离心，得到酵母细胞壁沉淀(产朊假丝酵母泥)；向酵母细胞壁沉淀中加入低共熔溶剂，混匀，在恒温水浴锅中提取；将混合物冷却，洗涤，离心，冷冻干燥，得到酵母β‑葡聚糖。所述低共熔溶剂包括氢键供体、氢键受体及去离子水，所述氢键供体为葡萄糖，所述氢键受体为氯化胆碱。本发明的低共熔溶剂提取酵母β‑葡聚糖的方法，原料利用率高，酵母β‑葡聚糖的得率为40～60％，且提取溶剂容易制作，对环境友好，本发明的提取方法简便，提取溶剂绿色环保可重复利用。

技术领域

本发明涉及一种利用低共熔溶剂提取酵母β-葡聚糖的方法，属于多糖提取技术领域。

背景技术

酵母β-葡聚糖(yeastβ-glucan，YG)是一种最具生物活性的葡聚糖，与一般糖类不同的是，酵母β-葡聚糖不是线性分子的结构，而是一种独特的三重超微螺旋结构，所以其免疫功能和生物活性最强。产朊假丝酵母(Candida utilis)作为美国食品药品管理局认证的可食用酵母，其细胞壁中含有β-葡聚糖，且产朊假丝酵母可以利用工业废水生产可食用蛋白和β-葡聚糖，有很好的研究价值。提取酵母β-葡聚糖的传统方法主要有酸法、碱法、酸碱结合法，但这些传统的提取方法由于大量酸碱的使用不仅可能会使酵母β-葡聚糖发生降解，同时还会腐蚀设备，造成环境的污染。酶制剂提取酵母β-葡聚糖，其优点是可以使细胞破壁，缩短提取时间，但是酶制剂的价格昂贵。目前，提取酵母β-葡聚糖的物理方法为超声波法，虽然超声波提取酵母β-葡聚糖工艺简便，得率高，但是所得的多糖纯度不高，甘露聚糖和蛋白质含量较高，仍需改进工艺提高纯度。

近年来，低共熔溶剂(DESs)在生物活性成分的提取上的应用备受关注。DESs是一种新型、绿色溶剂，性质类似离子液体，且价格低、易获得、毒性低、遇水不活泼，具有较好的生物可降解性。目前已被广泛应用于多酚、黄酮、多糖的提取。DESs具有极强的溶解能力与极广的溶解范围，因此采用DESs提取有效成分的提取率几乎都高于传统溶剂且生物活性也更强。氯化胆碱-葡萄糖是常用的DESs，其具有易制备、成本低、无毒等特点。但是，却未见利用低共熔溶剂提取酵母β-葡聚糖的相关报道。

发明内容

本发明解决的技术问题是：现有提取酵母β-葡聚糖的方法，其处理时间长，容易产生环境污染等问题。

为了解决上述技术问题，本发明提供了一种利用低共熔溶剂提取酵母β-葡聚糖的方法，包括以下步骤：

步骤1：以葡萄糖为氢键供体，氯化胆碱为氢键受体，加入去离子水配制低共熔溶剂；

步骤2：将产朊假丝酵母细胞加入到蒸馏水中，搅拌均匀形成混悬液，反复清洗，离心后得到沉淀物，将沉淀物加入到磷酸盐缓冲溶液中，诱导自溶，洗涤，离心，得到产朊假丝酵母泥；

步骤3：称取产朊假丝酵母泥于烧杯中，向其中加入低共熔溶剂，加热提取得到浸提液，将浸提液离心、洗涤，得到酵母β-葡聚糖。

优选地，所述步骤1中的氢键受体、氢键供体与去离子水的摩尔比为1：2～4：20～80。

优选地，所述步骤1中低共熔溶剂的配制方法为：将氢键受体、氢键供体与去离子水混合，于80℃下搅拌至澄清，得到低共熔溶剂。

优选地，所述步骤2的混悬液中酵母细胞的浓度为10～20g/L。

优选地，所述步骤3中的产朊假丝酵母泥与低共熔溶剂的比例为1g:15～30mL。

优选地，所述步骤3中加热提取的条件为：温度80～100℃，时间1～3h。

本发明与现有技术相比，具有如下有益效果：