[发明专利]一种强化微生物降解多环芳烃的方法及微生物菌剂有效
| 申请号: | 202111042043.2 | 申请日: | 2021-09-07 |
| 公开(公告)号: | CN113577637B | 公开(公告)日: | 2022-07-12 |
| 发明(设计)人: | 王芳;王紫泉;曾军;生弘杰;相雷雷;卞永荣;蒋新 | 申请(专利权)人: | 中国科学院南京土壤研究所 |
| 主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;A62D3/02;C12R1/01;A62D101/20 |
| 代理公司: | 江苏瑞途律师事务所 32346 | 代理人: | 王玉姣;陈彬 |
| 地址: | 210008 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 强化 微生物 降解 芳烃 方法 | ||
1.一种强化微生物降解多环芳烃的方法,其特征在于,包括将微生物接种于阳离子改性蒙脱土的步骤;所述微生物为分枝杆菌(Mycobacterium sp.)NJS-1,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号CGMCC 1.10964;
所述阳离子改性蒙脱土包括Fe(III)、Co(II)或Na(I)改性蒙脱土中的一种;
所述多环芳烃为芘;
包括以下步骤:
S1采用灭菌营养肉汤培养基培养扩繁分枝杆菌(Mycobacterium sp.)NJS-1,随后调整菌密度为OD600=0.30;
S2向阳离子改性蒙脱土中加入灭菌无机盐培养基,所述改性蒙脱土与无机盐培养基固液质量比为1:20~1:100;随后接种步骤S1所述分枝杆菌(Mycobacterium sp.)NJS-1,分枝杆菌(Mycobacterium sp.)NJS-1菌株接种稀释后OD600不小于0.03;
S3将接种菌后的阳离子改性蒙脱土与含有多环芳烃的污染物在适宜条件下混合培养,降解多环芳烃;
或
S1采用阳离子改性蒙脱土吸附固定含有多环芳烃的污染物;
S2采用灭菌营养肉汤培养基培养扩繁分枝杆菌(Mycobacterium sp.)NJS-1,调整菌密度为OD600=0.30;
S3向吸附有污染物的阳离子改性蒙脱土中加入灭菌无机盐培养基,所述改性蒙脱土与无机盐培养基固液质量比为1:20~1:100;随后接种步骤S2所述分枝杆菌(Mycobacteriumsp.)NJS-1,分枝杆菌(Mycobacterium sp.)NJS-1菌株接种稀释后OD600不小于0.03;在适宜条件下混合培养,降解多环芳烃;
所述阳离子改性蒙脱土通过离子交换法制备,具体包括:
a)蒙脱土与金属阳离子的氯化物溶液固液比为1:20;
b)金属阳离子当量浓度为0.1N;
c)采用离子交换法,交换次数不小于2次;
d)每次交换震荡平衡时间不小于2h;
e)交换完成后,用超纯水清洗4次以上直至无Cl-。
2.根据权利要求1所述的强化微生物降解多环芳烃的方法,其特征在于,所述分枝杆菌(Mycobacterium sp.)NJS-1扩繁条件包括:好氧培养,在灭菌营养肉汤培养基中接种适量菌液,在28℃和160rpm避光条件下培养过夜;用灭菌pH7.0 0.1M磷酸盐缓冲液清洗两次,调整菌密度。
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