[发明专利]检测朗格罕细胞组织细胞增生症的突变

说明书

本申请提供了检测朗格罕细胞组织细胞增生症的MAP3K10基因A17T和/或R823C突变，并提供了相应检测试剂。上述突变可以激活RAS‑RAF‑MEK‑ERK通路，可作为朗格罕细胞组织细胞增生症检测标志物，为诊断试剂盒和治疗提供新靶点。

技术领域

本发明属于肿瘤分子生物学诊断领域，具体地，本申请提供了检测朗格罕细胞组织细胞增生症的突变及其具体应用。

背景技术

朗格罕细胞组织细胞增生症（LCH）是一类以CD1a和/或CD207阳性树突状细胞异常克隆性增殖聚集、并导致组织损伤为特点的疾病，可发生于任何年龄，多发于幼年儿童，15岁以下儿童年发病率约为2.6-8.9/100万。该病临床表现复杂多变、异质性极强，轻者表现为自限性的单纯骨或皮肤损害，重者累及全身多个器官或系统，如骨、皮肤、淋巴结、肺、垂体、耳、眼、口腔、甲状腺等，肝、脾、骨髓这些危险器官受累会危及生命。该病极易误诊、误治，治疗过程中容易复发，病情反复进展易遗留尿崩、生长发育迟缓、骨骼畸形等后遗症，是血液系统疑难罕见病的代表病种之一。

2010年研究人员首次发现，在57%的LCH患者中存在B-Raf原癌基因丝氨酸/苏氨酸激酶（BRAF）基因的V600E突变，导致丝裂原活化蛋白激酶（Mitogen activated proteinkinase, MAPK） RAS-RAF-MEK-ERK信号通路的激活（Badalian-Very 等, Blood 2010, 116(11): 1919-1923.）。之后陆续在LCH中发现其它MAPK通路相关基因的突变，如MAP2K1（Brown等, Blood 2014, 124 (10): 1655-1658.）、BRAF缺失（Chakraborty等, Blood2016, 128 (21), 2533-2537.）、ARAF（Nelson等, Blood 2014, 123 (20): 3152-3155.）、ERBB3（Chakraborty等, Blood 2014, 124 (19): 3007-3015.）、MAPK3及MAPK7（Durham等,Nature Medicine 2019, 25 (12): 1839-1842.）等基因突变；少数患者中存在PI3K信号通路的基因突变，如PIK3CA、PIK3CD突变等（Héritier等, Blood 2015, 125 (15): 2448-2449.），这些突变均导致了细胞外调节蛋白激酶（Extracellular signa regulatedkinase, ERK）的磷酸化激活。同时，在LCH中发现BRAF、NTRK3等激酶融合体也可导致MAPK通路的激活，如PACSIN2-BRAF（Zarnegar等, Pediatr Blood Cancer 2018, 65 (1).10.1002/pbc.26699.）、FAM73A-BRAF（Chakraborty等, Blood 2016, 128 (21), 2533-2537.）、PLEKHA6-NTRK3（Cai等, International Journal of Cancer 2019, 144 (1),117-124.）等融合基因，导致LCH的发病。但是，目前仍然有20%左右的LCH患者中，未发现明确的已知致病相关基因突变，导致MAPK通路激活的分子机制未知，其分子谱尚未完全清楚。

目前认为LCH是一种骨髓髓系来源的肿瘤，但又同时具有炎症性疾病的特点，发病机制尚不明确。研究表明，BRAF-V600E突变是LCH重要的致病驱动基因，该突变在不同细胞中发生的层级可能决定了临床表现的差异，并与临床危险度及预后相关；针对BRAF-V600E突变的靶向治疗如维罗非尼、达拉非尼已被尝试用于治疗复发/难治性LCH患者，显示出良好的治疗反应和安全性。然而，具有BRAF-V600E突变患者的表现和预后仍存在较大的差异，提示其它遗传学改变的存在可能对患者的发病及预后产生重要影响。由于疾病的极强异质性，MAP2K1、ARAF等其它相关基因突变的临床意义、与预后的关系及分子靶向治疗的应用尚不明确。