[发明专利]一株大肠杆菌噬菌体GN4-1及其应用

说明书

本发明公开了一株大肠杆菌噬菌体GN4‑1，所述大肠杆菌(Escherichiacoli phage)GN4‑1保藏号为CCTCC M 2021880；所述大肠杆菌噬菌体GN4‑1在制备预防和治疗大肠杆菌感染的疾病的药物中的应用。本发明大肠杆菌噬菌体GN4‑1能裂解20株不同来源大肠杆菌的宽谱大肠杆菌噬菌体，能同时杀灭多种细菌、且稳定性高、安全性好，易制成制剂等，对感染大肠杆菌的动物和被大肠杆菌污染的环境均有很好的治疗、杀灭作用。

技术领域

本发明涉及大肠杆菌噬菌体的技术领域，特别涉及一株大肠杆菌噬菌体GN4-1及其应用。

背景技术

大肠埃希氏杆菌是中等大小杆菌，呈短杆状，其大小为1～3um×0.5～0.7um，有鞭毛，无芽胞，有的菌株可形成荚膜，革兰氏染色阴性，需氧或兼性厌氧，生化反应活泼、易于在普通培养上增殖，适应性强，是人和动物肠道中的常见细菌，可分为致病性和非致病性两大类。大肠杆菌的抗原成分复杂，可分为菌体抗原(O)、鞭毛抗原(H)和表面抗原(K)，根据菌体抗原的不同，可将大肠杆菌分为二百多个型，其中一些特殊血清型的大肠杆菌对人和动物具有致病性，尤其对婴儿和幼畜，常引起严重腹泻和败血症。大肠杆菌对热的抵抗力较其他肠道杆菌强，60℃短时间内加热后仍有部分细菌存活。大肠杆菌在自然界的水中可存活数周至数月，在温度较低的粪便中则存活更久。大肠杆菌病一年四季均可发生，每年在多雨、闷热、潮湿季节多发。

噬菌体(bacteriophage,phage)是感染细菌、真菌、藻类、放线菌或螺旋体等微生物的病毒的总称，因部分能引起宿主菌的裂解，故称为噬菌体。噬菌体是病毒的一种，其特别之处是专以细菌为宿主，跟别的病毒一样，噬菌体只是一团由蛋白质外壳包裹的遗传物质，大部分噬菌体还长有尾巴，用来将遗传物质注入宿主体内。中国专利CN112680423A公开了一种能同时裂解四种细菌的宽谱强裂解性大肠杆菌噬菌体，命名为EC35P1，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期为2020年8月20日，保藏编号为CCTCCM2020438。该噬菌体除对大肠杆菌具有较好的裂解作用外，还可裂解志贺氏菌、沙门氏菌、阴沟肠杆菌，且可实现大规模工业生产。韩国专利KR102003786B1公开了一种新的大肠杆菌特异性噬菌体EcoH7及其制备方法。该噬菌体EcoH7对大肠杆菌具有非常高的特异性，可以解决大肠杆菌对抗生素的耐药性与食品中的大肠杆菌的残留问题，且具有广泛的宿主范围，可广泛用于抗生素、组合物、饲料、消毒剂或清洗剂领域。中国专利CN108103031A公开了一种水产养殖用宽谱噬菌体大肠杆菌噬菌体NTHP01以基因工程大肠杆菌DH5α为宿主菌发酵制备，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期为2014年8月28日，保藏编号为CGMCC No.9623。该噬菌体除了气单胞菌具有较好的裂解作用外，还可裂解其他细菌(迟缓爱德华氏菌、副溶血性弧菌、溶藻弧菌、霍乱弧菌、格瓦斯细菌、弗氏柠檬酸杆菌、肠杆菌等常见细菌)也具有裂解作用(并未公开其具有宽谱性)。

关于大肠杆菌噬菌体的研究主要集中于肠出血性噬菌体裂解性方面，针对大肠杆菌噬菌体还能裂解其它属的细菌和应用方面的研究报道并不多。故寻找一株能同时杀灭多种细菌、且稳定性高、安全性好、效价高的新型大肠杆菌噬菌体分离物是非常有必要的。

发明内容

本发明针对上述技术问题，提供一株能裂解20株不同来源大肠杆菌的宽谱大肠杆菌噬菌体，旨为大肠杆菌的感染提供新的治疗方案，以及为大肠杆菌造成的环境和饲料等污染提供新型的消毒手段。

为实现上述目的，本发明提供的技术方案如下：

一株大肠杆菌噬菌体GN4-1，所述大肠杆菌(Escherichia coli phage)GN4-1保藏号为CCTCC M 2021880，保藏日期：2021年7月14日，保藏地址：湖北省武汉市武昌区八一路武汉大学中国典型培养物保藏中心。

如上所述大肠杆菌噬菌体(Escherichia coli phage)GN4-1在制备预防和治疗大肠杆菌感染的疾病的药物中的应用。