[发明专利]一种定量检测人脂多糖结合蛋白的试剂盒及方法在审
| 申请号: | 202111031010.8 | 申请日: | 2021-09-03 |
| 公开(公告)号: | CN113820496A | 公开(公告)日: | 2021-12-21 |
| 发明(设计)人: | 王睿瑞;张磊 | 申请(专利权)人: | 上海中医药大学 |
| 主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/58;G01N33/577;G01N33/543;G01N21/76 |
| 代理公司: | 上海唯智赢专利代理事务所(普通合伙) 31293 | 代理人: | 吴瑾瑜 |
| 地址: | 201203 上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 定量 检测 多糖 结合 蛋白 试剂盒 方法 | ||
1.一种定量检测人脂多糖结合蛋白的试剂盒,其特征在于,包括包被人脂多糖结合蛋白抗体的孔板。
2.权利要求1所述的定量检测人脂多糖结合蛋白的试剂盒,其特征在于,孔板每个检测孔或检测点上包被的人脂多糖结合蛋白抗体量为0.1-0.5μg。
3.权利要求1或2所述的定量检测人脂多糖结合蛋白的试剂盒,其特征在于,人脂多糖结合蛋白抗体为人脂多糖结合蛋白单克隆抗体或多克隆抗体。
4.权利要求1或2所述的定量检测人脂多糖结合蛋白的试剂盒,其特征在于,还包括以下试剂中的至少一种:(1)生物素标记的人脂多糖结合蛋白抗体;(2)链霉亲和素标记的辣根过氧化物酶或链霉亲和素标记的碱性磷酸酶;(3)辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶的发光底物。
5.权利要求1所述定量检测人脂多糖结合蛋白的试剂盒的制备方法,,其特征在于,包括将人脂多糖结合蛋白抗体包被在孔板上并用保护蛋白封闭,得到包被人脂多糖结合蛋白抗体的孔板。
6.一种定量检测人脂多糖结合蛋白的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将待测样品加到包被有人脂多糖结合蛋白抗体的孔板中;
(2)加入生物素标记的人脂多糖结合蛋白抗体;
(3)孵育并洗涤干燥;
(4)加入用链霉素和亲和素标记的辣根过氧化酶或链霉素和亲和素标记的碱性磷酸酶反应,洗涤干燥;
(5)加入酶发光底物,读取发光值。
7.权利要求6所述定量检测人脂多糖结合蛋白的方法,其特征在于,还包括步骤(6):与标准曲线对照,得到待测样品浓度。
8.权利要求6所述定量检测人脂多糖结合蛋白的方法,其特征在于,步骤(1)中,所述的待测样品为血液样本,包括血清样本或血浆样本。
9.权利要求6所述定量检测人脂多糖结合蛋白的方法,其特征在于,步骤(4)中,所述的生物素标记的人脂多糖结合蛋白抗体溶解于缓冲液中,得到含有生物素标记的人脂多糖结合蛋白抗体的工作溶液;链霉亲和素标记的辣根过氧化物酶或链霉亲和素标记的碱性磷酸酶溶解于缓冲液中,得到含有链霉素和亲和素标记的辣根过氧化物酶标记的工作溶液或含有链霉素和亲和素标记的碱性磷酸酶的工作溶液。
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