[发明专利]一种从白桐树中提取酚类化合物的方法

权利要求书

1.一种从白桐树中提取酚类化合物的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

步骤1：将白桐树植物原料加入溶剂进行提取获得提取液，提取液减压浓缩获得浸膏，所述溶剂为甲醇、乙醇或水中的任意一种或至少两种的组合；

步骤2：将步骤1所得浸膏加水分散至相对密度1.05～1.20(室温时测定值)，得水分散液，加入石油醚萃取，收集水相部分，再用乙酸乙酯萃取，收集乙酸乙酯部分，减压浓缩得乙酸乙酯萃取物；

步骤3：将步骤2所得乙酸乙酯萃取物经聚酰胺柱层析分离纯化得白桐树总多酚粗品；

步骤4：将步骤3所得白桐树总多酚粗品经C18柱层析分离纯化得柱层析样品I；

步骤5：将步骤4所得柱层析样品I经凝胶柱层析分离纯化得目标I段组分、目标II段组分和目标Ⅲ段组分；

步骤6：将目标I段组分和目标II段组分分别经半制备型高效液相色谱法分离纯化得酚类化合物cleomiscosin C、cleomiscosin A、6-姜烯酚和6-姜酚，所述半制备色谱的分离条件为：色谱柱为耐酸性C18色谱柱，以0.1～0.3wt％的磷酸水溶液和乙腈为流动相，检测波长300～365nm，流速2～5ml/min，分别收集对应于目标成分的色谱图特征峰的洗脱液，浓缩干燥既得所述酚类化合物；

将目标Ⅲ段组分经重结晶得酚类化合物莨菪亭，所述重结晶溶剂为甲醇、乙醇、氯仿中任意一种或至少两种的组合。

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤1中所述提取中白桐树植物原料与溶剂的质量体积比为1:8～20，单位为g/ml；所述提取方法为热回流提取、超声提取或超声辅助热回流提取中的任意一种或至少两种的组合；提取次数为1～4次，合并多次提取液，减压浓缩回收溶剂得浸膏；

优选地，所述超声提取，超声功率为20KHz～40KHz，超声时间为1～3h；

优选地，所述热回流提取，温度为50～100℃，时间为1～3h；

优选地，所述超声辅助热回流提取，超声功率为20KHz～40KHz，超声时间为1～3h，温度为50～100℃；

优选地，所述减压浓缩为浓缩至无有机溶剂气味且相对密度在1.20以下(室温时测定值)。

3.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤2中所述石油醚萃取中水分散液与石油醚的体积比为1:1～3；所述乙酸乙酯萃取中，水相部分与乙酸乙酯的体积比为1:1～3。

4.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤3中所述聚酰胺柱填料为粒径30～200目的聚酰胺；柱层析洗脱溶剂为乙醇水溶液，洗脱流速为5～20ml/min，洗脱方式为梯度洗脱：先用25vol％～30vol％乙醇洗脱5～8个柱体积除去杂质，再用60vol％～75vol％乙醇洗脱3～6个柱体积，收集洗脱液，最后用95vol％乙醇冲洗柱子；

优选地，所述洗脱在5～20bar的中低压色谱条件下进行。

5.根据权利要求4所述方法，其特征在于，步骤3中所述乙酸乙酯萃取物与聚酰胺填料的质量比为1:50～100；所述聚酰胺柱的高径比为5～10:1。

6.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤4中所述C18柱填料为RP-C18，孔径粒径40～63μm；柱层析洗脱溶剂为甲醇水溶液，洗脱流速为5～20ml/min，洗脱方式为：先用25vol％～30vol％甲醇洗脱4～8个柱体积去除杂质，再用60vol％～70vol％甲醇洗脱4～8个柱体积，收集洗脱液，最后用95vol％～100vol％甲醇冲洗柱子；

优选地，所述洗脱在5～20bar的中低压色谱条件下进行；

优选地，所述白桐树总多酚粗品与C18填料的质量比为1：100～150，所述C18柱的高径比为20～40:1。

7.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤5中所述凝胶柱填料为交联度≤25的交联葡聚糖凝胶及其衍生物；洗脱溶剂为氯仿甲醇混合溶剂，氯仿和甲醇的体积比为1:0.2～5；洗脱流速为3～5秒/滴；

优选地，所述柱层析样品I与凝胶填料的质量比为1：1500～2000，所述凝胶柱高径比为50～120:1。