[发明专利]一种同时生产阿洛酮糖和赤藓糖醇的方法在审
申请号: | 202111020374.6 | 申请日: | 2021-09-01 |
公开(公告)号: | CN114032264A | 公开(公告)日: | 2022-02-11 |
发明(设计)人: | 张金祥;张静超;张雷达 | 申请(专利权)人: | 康彤(上海)生物研发有限公司 |
主分类号: | C12P19/24 | 分类号: | C12P19/24;C12P19/02;C12P7/18;C07C29/74;C07C29/76;C07C29/78;C07C31/24;C07H1/06;C07H3/02;C12R1/645 |
代理公司: | 北京慕达星云知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11465 | 代理人: | 崔自京 |
地址: | 201499 上海市*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 同时 生产 阿洛酮糖 赤藓糖 方法 | ||
1.一种同时生产阿洛酮糖和赤藓糖醇的方法,其特征在于,具体步骤如下:
(1)以果葡糖浆为原料,采用D-阿洛酮糖3-差向异构酶将果糖转化为阿洛酮糖,置于发酵罐中灭酶备用;
(2)发酵罐中接入解脂耶氏酵母,待发酵罐中残余的果葡糖浆完全耗尽,DO回升至50-60%时停止发酵;具体发酵过程如下:
①菌体生长阶段:发酵开始后培养6-8h进入对数生长期,此时OUR数值呈抛物线的形式上升至35-45mol O2/L/h,发酵时间为17-23h;
②产赤藓糖醇阶段:发酵继续进行,OD600=30-35,OUR数值降低;发酵90-100h,OD600=60-65,此时罐内葡萄糖完全耗尽,果糖浓度0-5g/L,阿洛酮糖浓度没有明显变化,发酵结束;
(3)发酵结束后将发酵液进行过滤、脱色和离交;
(4)将步骤(3)获得的滤液进模拟移动床进行色谱分离;
(5)将步骤(4)分离的液体分别进行浓缩结晶,得阿洛酮糖和赤藓糖醇。
2.根据权利要求1所述的一种同时生产阿洛酮糖和赤藓糖醇的方法,其特征在于,步骤(1)的生物转化参数为:果葡糖浆为F90型,控制pH 7.0,加入1mM的MnCl2,D-阿洛酮糖3-差向异构酶酶活为100-150U/ml,果葡糖浆DS 72-76%,加酶量为果糖干重的4%-5%,反应温度为55-60℃,时间为4-6h,反应结束后阿洛酮糖的转化率占果糖所有量的28%-30%。
3.根据权利要求1所述的一种同时生产阿洛酮糖和赤藓糖醇的方法,其特征在于,步骤(2)所述解脂耶氏酵母的接种量为10%。
4.根据权利要求1所述的一种同时生产阿洛酮糖和赤藓糖醇的方法,其特征在于,步骤(2)所述发酵反应条件为温度30℃,罐压为0.02-0.04MPa,通风量为0.2-0.5vvm,初始pH6.8-7.0,反应结束时pH 2.5-3.0,溶解氧DO2-35%,发酵时长90-100h。
5.根据权利要求1所述的一种同时生产阿洛酮糖和赤藓糖醇的方法,其特征在于,步骤(2)所述发酵罐的成分包括:糖液300g/L、酵母粉5g/L、磷酸二氢钾10g/L、氯化钠5g/L、七水硫酸镁0.247g/L、磷酸氢二铵5g/L。
6.根据权利要求1所述的一种同时生产阿洛酮糖和赤藓糖醇的方法,其特征在于,步骤(3)所述过滤为使用板框过滤除杂质;所述脱色为使用活性炭脱色;所述离交为使用离子交换树脂去除盐分。
7.根据权利要求1所述的一种同时生产阿洛酮糖和赤藓糖醇的方法,其特征在于,步骤(4)所述色谱分离过程中参数控制如下:步骤(3)获得的滤液浓度20%-35%,温度45℃-55℃,压力0.2MPa-0.3MPa,水料质量比为1:1.5-2.5,进料速度为1.5-2m2/h。
8.根据权利要求1所述的一种同时生产阿洛酮糖和赤藓糖醇的方法,其特征在于,步骤(5)所述浓缩方法为梯度降温,所述梯度降温为控制循环水降温0.5-1℃/h,降至40℃开冷水速降3-5℃/h,直至29-30℃出料;结晶为糖液湿晶经振动流化床干燥后得到晶体。
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