[发明专利]辅助诊断桥本甲状腺炎的血清相关自身抗体标志物及其应用

说明书

本发明公开了辅助诊断桥本甲状腺炎的血清相关自身抗体标志物及其应用，该抗体标志物为Nc2b、KRAS、TMEM243、CDC42相关自身抗体中至少一种。本发明运用HuProt^TM人类蛋白质组芯片从桥本甲状腺炎患者血清样本中筛选出具有显著差异的相关自身抗体，进而采用ELISA法在更多样本中对筛选出的自身抗体进行验证，证实了Nc2b、KRAS、TMEM243、CDC42四种相关自身抗体及其组合物作为新的辅助诊断桥本甲状腺炎标记物的可靠性以及可重复性。运用高通量蛋白质组芯片技术筛选出桥本甲状腺炎血清相关自身抗体标志物有助于桥本甲状腺炎的早期辅助诊断，以早发现、早治疗。

技术领域

本发明涉及免疫学技术、血清抗体组学技术及疾病诊断领域，更具体地，本发明涉及辅助诊断桥本甲状腺炎的血清相关自身抗体标志物及其应用。

背景技术

桥本甲状腺炎(Hashimoto's thyroiditis,HT)又称桥本氏病(Hashimoto'sdisease,HD)或慢性淋巴细胞性甲状腺炎(Chronic lymphocytic thyroiditis,CLT)，是目前最常见的自身免疫性甲状腺疾病，也是导致甲状腺功能减退最常见的原因。据文献报道约20％-30％的患者会出现甲状腺功能减退。当前HT发病率逐年快速增加，已成为严重威胁人们健康和生活质量的一类常见疾病。有数据指出全世界有13.8％-38％的人患有HT，女性患病率为男性的4-10倍。我国目前尚缺乏大规模的HT流行病学调查研究，对不同地方的HT患病率相关报道1.03％-23.08％不等。HT常起病隐匿，早期无特异临床症状，因此易被漏诊、误诊，多数病例在常规体检时被发现，而大部分患者处于未知晓状态。目前对HT治疗固有地缺少有效药物，尤其发病早期缺少有效的治疗药物。因此提高桥本甲状腺炎的早期诊断率和研制更加高效安全的治疗药物是其治疗的关键。

桥本甲状腺炎的病因被认为是遗传易感性和环境因素相结合，导致免疫耐受丧失，进而对甲状腺组织进行自身免疫攻击而发生疾病，其中79％的易感性由遗传因素造成，21％是环境和其他因素影响，如吸烟、碘摄入、硒缺乏、维生素D缺乏、干扰素α类药物治疗、放射暴露、胎儿微嵌合体、怀孕、更年期等。HT发病机制至今尚未完全阐明，根据已有研究主要与细胞免疫、抑制和调节性T细胞缺陷、细胞毒性和细胞凋亡、体液免疫、甲状腺自身抗体、钠碘转运体和pendrin抗体、细胞因子、趋化因子作用有关。其病理过程包括形成甲状腺自身抗体，损伤甲状腺细胞，破坏甲状腺组织。目前常用于临床诊断的甲状腺自身抗体包括抗甲状腺球蛋白抗体(TgAb)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)或甲状腺微粒体抗体(TMAb)、TSH受体抗体(TRAb)(包括TSH受体刺激性抗体(TSAb)、TSH刺激阻断性抗体(TSBAb)和TSH受体结合抑制免疫球蛋白(TBII))。其中TPOAb被认为是HT最重要的特征，约95％的患者存在TPOAb，而TgAb诊断的可靠性较TPOAb低，在60％-80％的病例中存在。自身抗体的产生是自身免疫性疾病的基本特征之一，除上述甲状腺相关自身抗体，桥本甲状腺炎患者血清中可能还存在许多针对其他特异性和非特异性抗原产生的自身抗体，然而目前鲜有关于HT相关自身抗体及血清诊断标志物的筛选和研究。

HuProt^TM人类蛋白质组芯片含有20000个新测序的全长人类重组蛋白，对应16152个独特的蛋白编码基因，覆盖率高达81％，是迄今为止世界上最高通量的人重组蛋白质组芯片，与其他蛋白质组芯片相比具有高灵敏度、特异度，可以对各种蛋白质、抗体以及配体进行检测。该芯片已应用于标志物筛选鉴定、小分子靶标、蛋白与蛋白相互作用、核酸与蛋白相互作用、病原菌与宿主相互作用、抗体特异性研究等，正在成为一种在癌症和自身免疫性疾病中发现新的自身抗体和生物标志物的高效方法。目前国内外学者应用该蛋白质组芯片在肺癌、胃癌、卵巢癌、结直肠癌、胶质瘤、神经精神性狼疮、白塞病等疾病生物标志物的研究中均有新的发现。但目前尚未有应用此技术筛选桥本甲状腺炎诊断标志物的研究。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明的目的是提供辅助诊断桥本甲状腺炎的血清相关自身抗体标志物及其应用，该抗体标志物能够有效、准确地辅助诊断桥本甲状腺炎。